Anticorpo Monoclonale Anti-Umano CD59 per Citometria a Flusso (FC) - P13987

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del CD59

• Il CD59, noto anche come protectina, proteina inibitoria MAC (MAC-IP) e fattore di restrizione omologo da 20 kDa (HRF20), è una glicoproteina ancorata al GPI che funge da regolatore critico del complemento.
• Funziona come potente inibitore del complesso di attacco di membrana (MAC) legandosi ai componenti C8 e C9, impedendo la formazione del poro citolitico. Riferimenti correlati: PMID:11882685 PMID:1698710 PMID:2475111 PMID:36797260
• Il CD59 è ampiamente espresso sulle cellule umane, ancorato alla membrana plasmatica tramite una porzione glicosilfosilinositolo (GPI) e protegge le cellule ospiti dalla lisi mediata dal complemento autologo.
• Una forma solubile, trovata nelle urine, mantiene il legame del complemento ma mostra un'attività inibitoria MAC not molto più ridotta rispetto alla isoforma legata alla membrana.
• La proteina subisce modifiche post-traduzionali tra cui la formazione di ponti disolfuro, glicazione e glicosilazione N-legata; le mutazioni sono collegate all'anemia emolitica ereditaria.
• Lo splicing alternativo genera varianti di trascrizione multiple e la proteina è stata identificata tramite sequenziamento proteico diretto e proteomica su larga scala.
• A livello subcellulare, il CD59 si localizza sulla membrana cellulare ed è anche secreto, contribuendo all'evasione immunitaria e alla segnalazione oltre l'inibizione del complemento.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• L'immunogeno copre gli aminoacidi 26–101 del CD59 umano, che corrispondono al dominio extracellulare maturo; ci si aspetta che l'anticorpo riconosca il CD59 nativo legato alla membrana. Considerare l'uso di un controllo isotopico confrontato per gli esperimenti di citometria a flusso.
• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo coniugato su cellule mononucleari del sangue periferico umano (PBMC) o linee cellulari che esprimono CD59 per determinare la concentrazione ottimale di colorazione.
• Il CD59 è ancorato al GPI; evitare trattamenti che possono rilasciare proteine ancorate al GPI (es. fosfolipasi C) a meno che non si stia valutando specificamente la dipendenza dall'ancora. Validare nel sistema di campione pertinente.
• La reattività crociata è riportata solo per l'umano; se si lavora con modelli non umani, validare la specificità e la reattività prima dell'uso.

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