Anticorpo Monoclonale Anti-Umano FAP per FC - Q12884

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della FAP

• La prolil endopeptidasi FAP (nota anche come seprase, FAPalpha, DPPIV, SIMP) è una glicoproteina di superficie cellulare e una serina proteasi che esiste come omodimero di ~170 kDa costituito da monomeri di ~88 kDa.
• La proteasi mostra attività endopeptidasica di clivaggio post-prolina con una marcata preferenza per i motivi Ala/Ser-Gly-Pro-Ser/Asn/Ala, mirando a substrati come l'alfa-2-antiplasmina (SERPINF2) e SPRY2. Riferimenti correlati: PMID:14751930, PMID:16223769, PMID:16410248
• Possiede anche attività di peptidil dipeptidasi, idrolizzando legami prolilici a due residui dall'estremità N-terminale di substrati sintetici (es. Ala-Pro, Ile-Pro, Gly-Pro, Arg-Pro, Pro-Pro) e processando neuropeptidi naturali tra cui NPY, PYY, sostanza P e BNP. Riferimenti correlati: PMID:10347120, PMID:10593948, PMID:16175601, PMID:21314817
• La FAP degrada la gelatina e il collagene di tipo I denaturato dal calore, ma non cliva i collagene nativi o diversi altri componenti della MEC come la fibronectina e la laminina. Riferimenti correlati: PMID:10347120, PMID:10455171, PMID:12376466
• Sulla membrana plasmatica, la FAP si associa a DPP4, PLAUR o integrine per mediare la proteolisi pericellulare della MEC, promuovendo così l'adesione cellulare, la migrazione e l'invasione.
• La FAP è ancorata sulla superficie cellulare e arricchita nelle protrusioni membranari (lamellipodia, invadopodia, ruffles); si trova anche come forma secreta e nel citoplasma.
• La proteina è espressa nei fibroblasti stromali attivati di vari tessuti, inclusi le ferite in guarigione, il fegato fibrotico e i tumori epiteliali, così come nelle cellule del glioma e del melanoma. È assente nel fegato normale.
• Due isoforme (isoforma 1 e isoforma 2) sono prodotte per splicing alternativo, entrambe rilevate in linee cellulari di melanoma, carcinoma e fibroblasti.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale di colorazione e includere sempre i controlli di isotipo appropriati.
• È noto che la FAP subisce clivaggio proteolitico e glicosilazione, il che può comportare bande multiple (es. ~27 kDa e ~87 kDa) nell'immunorilevamento. Validare le condizioni di rilevamento utilizzando un controllo positivo pertinente (es. linee cellulari che esprimono FAP).
• Dato che la FAP è una proteina transmembrana, si possono considerare protocolli di colorazione su cellule vive; evitare buffer di permeabilizzazione se si mirano a epitopi extracellulari.
• Confermare che le impostazioni del laser e del filtro del citometro a flusso siano compatibili con (massimi di eccitazione/emissione ~590/617 nm).

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