Anticorpo monoclonale anti-Glypican 3 (GPC3) umano per citometria a flusso - P51654

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della Glypican-3

• La Glypican-3 (GPC3) è un proteoglicano della superficie cellulare ancorato alla membrana plasmatica tramite un'ancora GPI (PubMed:14610063). Riferimenti correlati: PMID:14610063
• Regola negativamente la segnalazione Hedgehog competendo con PTC1 per le proteine Hedgehog e promuovendo l'internalizzazione e la degradazione di SHH.
• GPC3 regola positivamente la via canonica Wnt legandosi ai recettori Frizzled e potenziando il legame dei ligandi Wnt (PubMed:16227623, PubMed:24496449). Riferimenti correlati: PMID:16227623 PMID:24496449
• La proteina inibisce l'attività della dipeptidil peptidasi DPP4 (PubMed:17549790) e si lega inoltre a CD81 per modulare la repressione trascrizionale mediata da HHEX. Riferimenti correlati: PMID:17549790
• Durante l'embriogenesi, GPC3 è essenziale per la definizione del pattern degli arti, lo sviluppo scheletrico e la morfogenesi della ramificazione renale, modulando la segnalazione di BMP e FGF.
• Espressione tissutale: elevata nella placenta (confermata a livello proteico), nei polmoni, nel fegato e nei reni, in correlazione con il suo ruolo nell'organogenesi e nella biologia tumorale.
• Le modifiche post-traduzionali includono il clivaggio, l'attacco di eparan solfato e la fosforilazione; lo splicing alternativo genera isoforme osservate a 59–68 kDa (massa canonica di 65,6 kDa).
• Parole chiave: Membrana cellulare, ancora GPI, Glicoproteina, Eparan solfato, Proteoglicano, Variante associata a malattia.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide C-terminale (aa 481–580) vicino al sito di attacco GPI; l'anticorpo può riconoscere sia le forme a lunghezza intera sia quelle clivate, ma è necessario validarlo nel proprio sistema campione specifico.
• Essendo un coniugato diretto , questo anticorpo è pronto all'uso per la citometria a flusso senza necessità di colorazione secondaria; si consiglia di titolare l'anticorpo per ottimizzare il rapporto segnale/rumore.
• Data la localizzazione di GPC3 sulla superficie cellulare, è possibile utilizzare protocolli di colorazione di cellule vive; le condizioni di fissazione/permeabilizzazione devono essere testate empiricamente qualora si intendano analizzare anche epitopi intracellulari.
• Per i pannelli di citometria a flusso multiparametrica, assicurarsi che la sovrapposizione spettrale con altri fluorofori sia minima; è eccitato a 488 nm ed emette a circa 520 nm.
• Non sono disponibili dati sulla reattività crociata con altre specie; se necessario, l'espressione nel topo o nel ratto deve essere confermata.

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