Anticorpo monoclonale anti-IgD umano per WB, FC, ELISA - P01880

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di IgD

• La catena pesante costante delta dell'immunoglobulina (IgD) è la regione costante delle catene pesanti delta delle immunoglobuline, esistente come glicoproteine legate alla membrana (mIgD) o secrete (sIgD). Ogni molecola di IgD possiede due siti di legame all'antigene formati dai domini variabili di una catena pesante e una leggera.
• IgD funge da principale isotipo di recettore dell'antigene sulla superficie della maggior parte delle cellule B periferiche, coespresso con IgM. Il legame dell'antigene a mIgD innesca l'attivazione delle cellule B, l'espansione clonale e la differenziazione, e induce la fosforilazione di CD79A/CD79B da parte delle chinasi Src. Riferimenti correlati: PMID:20176268, PMID:22158414
• Le regioni variabili di IgD sono generate dalla ricombinazione V(D)J e possono subire ipermutazione somatica, consentendo la maturazione dell'affinità in seguito all'incontro con l'antigene. Riferimenti correlati: PMID:17576170, PMID:20176268
• L'IgD solubile (sIgD) si trova nel siero a concentrazioni inferiori rispetto a IgG, IgA e IgM ma molto superiori rispetto a IgE. L'attivazione delle cellule B downregola la secrezione di sIgD.
• IgD è un potente induttore di citochine pro-infiammatorie come TNF, IL1B, IL6 e IL10 dalle cellule mononucleate del sangue periferico, mediato prevalentemente dai monociti. Riferimenti correlati: PMID:10702483, PMID:11282392, PMID:8774350
• IgD è una glicoproteina con legami disolfuro intra- e inter-catena. Lo splicing alternativo genera isoforme, e il peso proteico della regione costante è di circa 42–47,5 kDa.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Per Western blot (WB): L'anticorpo riconosce una banda a circa 42–47,5 kDa in condizioni riducenti. Verificare l'espressione in linee cellulari B (ad es. Ramos o Daudi) o cellule mononucleate del sangue periferico.
• Per citometria a flusso (FC): Eseguire la colorazione di superficie su cellule B umane vitali; la fissazione e la permeabilizzazione possono essere necessarie per il rilevamento intracellulare di sIgD in cellule attivate.
• Per ELISA: Utilizzare come anticorpo di cattura o di rilevamento in formati ELISA sandwich per la quantificazione di IgD umano; assicurare la specificità contro altri isotipi di immunoglobuline mediante test crociati.
• L'immunogeno copre la regione costante (aa 99-384), suggerendo che l'anticorpo rileva tutte le isoforme di IgD che condividono questa sequenza. Considerare la validazione nel sistema di campioni e nell'applicazione rilevanti, poiché le condizioni possono variare.

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