Anticorpo monoclonale coniglio anti-IgM umana (FC) per WB, IF/ICC, FC, ELISA - P01871

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della catena pesante costante delle immunoglobuline Mu (Catena pesante IgM umana)

• Identità proteica e gene: La catena pesante costante mu delle immunoglobuline (catena pesante IgM) è codificata dal gene IGHM. Tra i nomi alternativi figurano regione C della catena mu Ig BOT, GAL e OU.
• Funzione della catena pesante delle immunoglobuline: In quanto regione costante delle immunoglobuline, svolge un ruolo centrale nell'immunità umorale, formando recettori legati alla membrana che innescano l'attivazione delle cellule B e anticorpi secreti che eliminano gli antigeni. La maturazione dell'affinità viene raggiunta tramite ipermutazione somatica. Riferimenti correlati: PMID:17576170 PMID:20176268 PMID:22158414
• Assemblaggio multimerico dell'IgM secretata: La regione costante dell'IgM secretata (sIgM) multimerizza in pentameri e occasionalmente esameri, conferendo alta avidità per il legame con antigeni polivalenti. Riferimenti correlati: PMID:32029689 PMID:37095205
• Funzioni effetrici della sIgM: La sIgM attiva la via classica del complemento reclutando la C1q e promuove la fagocitosi di cellule apoptotiche e patogeni attraverso interazioni con i recettori Fc e la lecitina legante il mannosio. Riferimenti correlati: PMID:12847249 PMID:19006321 PMID:28230186
• IgM legata alla membrana nel complesso BCR: La forma legata alla membrana costituisce il recettore delle cellule B (BCR), fornendo segnali tonici per la sopravvivenza delle cellule B e mediando la selezione del pre-BCR e l'esclusione allelica.
• Localizzazione subcellulare: L'IgM si trova sia secreta nei fluidi extracellulari sia ancorata alla membrana cellulare, coerente con il suo duplice ruolo di effettore umorale e recettore di superficie.
• Caratteristiche strutturali e post-traduzionali: La proteina contiene domini immunoglobulinici, subisce glicosilazione e formazione di legami disolfuro ed è un bersaglio dello splicing alternativo. Sono disponibili il sequenziamento proteico diretto e le strutture tridimensionali.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre la regione Fc (aa 218–453) comune a tutte le isoforme IgM umane; ci si aspetta quindi che l'anticorpo reagisca sia con l'IgM secretata che con quella legata alla membrana.
• Per il Western blot in condizioni riducenti, la catena pesante IgM migra a circa 75 kDa a causa della glicosilazione, sebbene il peso non modificato previsto sia 49 kDa. Validare lo spostamento della banda nel tuo lisato.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, l'IgM di superficie può essere rilevata sulle cellule B vive; la permeabilizzazione può rivelare i pool intracellulari. Ottimizzare la fissazione e la permeabilizzazione per il tuo tipo cellulare.
• Citometria a flusso: questo anticorpo è adatto per la colorazione dell'IgM di superficie delle cellule B. Titolare l'anticorpo e includere appropriati controlli isotipici.
• ELISA: utilizzare questo anticorpo come reagente di rilevamento per l'IgM umana in saggi immunoassay a sandwich. La reattività crociata con altre specie deve essere verificata se si estende a campioni non umani.
• Validare sempre l'anticorpo nel sistema di campione pertinente nelle tue specifiche condizioni sperimentali.

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