Anticorpo monoclonale anti-IL-6R/CD126 umano () per citometria a flusso intracellulare - P08887

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di IL-6R/CD126

• La subunità alfa del recettore dell'interleuchina-6 (IL-6R/CD126/gp80) è una glicoproteina transmembrana appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline; una forma solubile (sIL6R) viene generata mediante splicing alternativo.
• Fa parte del recettore dell'interleuchina 6: lega IL6 con bassa affinità e richiede l'associazione con IL6ST/gp130 per la trasduzione del segnale, regolando le risposte immunitarie, le reazioni di fase acuta e l'emopoiesi (PubMed:28265003, PubMed:30995492, PubMed:31235509). Riferimenti correlati: PMID:28265003, PMID:30995492, PMID:31235509
• IL6R legato alla membrana media la «segnalazione classica», prevalentemente rigenerativa e antinfiammatoria; promuove inoltre la differenziazione Th17 attraverso la «segnalazione a cluster» tra cellule dendritiche e cellule T.
• IL6R solubile agisce come agonista: il complesso IL6:sIL6R (iper-IL6) consente la «trans-segnalazione» nelle cellule prive di IL6R di membrana, promuove la produzione di VEGF ed è responsabile delle proprietà pro-infiammatorie nelle malattie infiammatorie croniche (PubMed:21990364, PubMed:12794819). Riferimenti correlati: PMID:21990364, PMID:12794819
• sIL6R svolge anche ruoli protettivi: è necessario per la rigenerazione del tessuto epatico dopo una lesione e regola l'omeostasi energetica e del glucosio nel sistema nervoso centrale.
• Localizzazione subcellulare: il recettore a lunghezza intera è una proteina di membrana di tipo I a singolo passaggio; la forma solubile viene secreta.
• Espresso nelle cellule mononucleate del sangue periferico; sIL6R è rilevabile nelle urine e nel siero, con l'1-20% derivante da splicing alternativo (PubMed:28060820). Riferimenti correlati: PMID:28060820
• Le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione N-linked e la formazione di legami disolfuro all'interno del dominio extracellulare simile alle immunoglobuline.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 20-358) copre l'intero dominio extracellulare; l'anticorpo può riconoscere sia IL-6R legato alla membrana sia sIL6R solubile. Validare nel sistema campione pertinente.
• Questo coniugato consente il rilevamento diretto mediante citometria a flusso senza un anticorpo secondario. Verificare la compatibilità dello strumento (eccitazione ~650 nm, emissione ~665 nm) e impostare i controlli di compensazione.
• Per la colorazione intracellulare, ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione per il proprio tipo cellulare, al fine di mantenere l'accessibilità dell'epitopo e ridurre al minimo il fondo.
• Utilizzare controlli negativi appropriati (ad esempio, controllo isotipico, cellule knockout/knockdown) per confermare la specificità nel proprio test.

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