Anticorpo monoclonale anti-LAMP2 umano per citometria a flusso intracellulare - P13473

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di LAMP2

• LAMP2 è una glicoproteina di membrana lisosomiale fortemente glicosilata, contenente un ponte disolfuro e appartenente alla famiglia LAMP.
• Agisce come inibitore diretto del canale protonico lisosomiale TMEM175, regolando così il pH del lume lisosomiale e consentendo un'attività ottimale delle idrolasi. Riferimenti correlati: PMID:37390818
• Funziona come recettore essenziale per l'autofagia mediata da chaperoni (CMA), legando i substrati riconosciuti dagli chaperoni citosolici (ad es., GAPDH, GPX4, NLRP3) e indirizzandoli alla degradazione lisosomiale. Riferimenti correlati: PMID:11082038 PMID:18644871 PMID:24880125 PMID:36586411
• È necessaria per la fusione tra autofagosomi e lisosomi; le cellule prive di LAMP2 non riescono a reclutare STX17 sugli autofagosomi, impedendo la degradazione del carico autofagico. Riferimenti correlati: PMID:27628032
• Favorisce una presentazione efficiente degli antigeni esogeni tramite MHC di classe II, consentendo la degradazione lisosomiale delle proteine, sebbene non sia necessaria per la presentazione degli antigeni endogeni. Riferimenti correlati: PMID:15894275 PMID:20518820
• Favorisce la scissione, mediata da FURIN, della proteina di fusione F del virus della parotite interagendo sia con FURIN sia con la proteina virale non processata.
• È soggetta a splicing alternativo, che produce tre isoforme (LAMP-2A, -2B, -2C) con distribuzioni tissutali distinte; LAMP-2A è abbondante nella placenta, nei polmoni e nel fegato, mentre LAMP-2B è ampiamente espressa e LAMP-2C è arricchita nel tratto digerente e nel cervello. Riferimenti correlati: PMID:26856698 PMID:7488019
• Si localizza principalmente nelle membrane di lisosomi, endosomi e autofagosomi e può essere rilevata anche sulla superficie cellulare.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio luminale (amminoacidi 29-375) di LAMP2 umano; è probabile che l'anticorpo riconosca un epitopo extracellulare/luminale accessibile dopo la permeabilizzazione.
• Per la citometria a flusso intracellulare, assicurarsi di utilizzare condizioni di fissazione e permeabilizzazione appropriate, ottimizzate per il coniugato , al fine di preservare il segnale di fluorescenza.
• LAMP2 è espresso in molti tipi cellulari; si consiglia di includere controlli positivi appropriati (ad es., HeLa, Jurkat) e controlli negativi per confermare la specificità nel proprio sistema sperimentale.
• Se è richiesta la reattività crociata tra specie, validare l'anticorpo nei campioni non umani pertinenti, poiché la reattività crociata può dipendere dalla conservazione dell'epitopo.
• Quando si combina il rilevamento di LAMP2 con altri marcatori lisosomiali, verificare la compatibilità dei protocolli di fissazione e permeabilizzazione per preservare l'antigenicità e l'integrità del colorante.

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