Anticorpo monoclonale anti-LILRA2/CD85h umano per IF/ICC, FC - Q8N149

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di LILRA2/CD85h

• LILRA2 (recettore A2 della sottos famiglia dei recettori leucocitari simili alle immunoglobuline), indicato anche come CD85h, ILT-1 e LIR-7, è una proteina di membrana di tipo I a singolo passaggio appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline. Attraverso lo splicing alternativo vengono prodotte diverse isoforme proteiche, con pesi molecolari riportati di circa 47–53 kDa.
• In qualità di recettore dell’immunità innata, LILRA2 riconosce specificamente le immunoglobuline troncate all’estremità N-terminale, generate dalla scissione proteolitica operata da vari batteri e funghi patogeni, tra cui L. pneumophila, M. hyorhinis, S. pneumoniae, S. aureus e C. albicans. Questo riconoscimento induce l’attivazione dei neutrofili e il rilascio di mediatori infiammatori da parte di monociti ed eosinofili. Riferimenti correlati: PMID:12529506 PMID:27572839 PMID:22479404
• Il recettore si lega a un sottogruppo di molecole IgM, IgG3 e IgG4 scisse, ma non interagisce con IgA1 scissa né con gli antigeni MHC di classe I, indicando una specificità per determinate immunoglobuline modificate dai patogeni. Riferimenti correlati: PMID:27572839 PMID:19230061
• In seguito al legame con il ligando nei monociti, LILRA2 riduce le risposte al lipopolisaccaride batterico (LPS), probabilmente diminuendo l’espressione e la segnalazione di TLR4, e induce la secrezione di CSF2, CF3, IL6, CXCL8 e CCL3. Riferimenti correlati: PMID:22479404
• Negli eosinofili, l’attivazione del recettore promuove il rilascio di RNASE2, IL4 e leucotriene C4, amplificando ulteriormente le cascate infiammatorie. Riferimenti correlati: PMID:12529506
• LILRA2 viene rilevato prevalentemente sulla superficie dei monociti del sangue periferico, dei neutrofili, dei basofili e degli eosinofili, mentre la sua espressione è molto bassa o assente sulle cellule T, sulle cellule B, sulle cellule dendritiche e sulle cellule NK. Riferimenti correlati: PMID:12529506 PMID:22479404 PMID:9548455
• Alla proteina sono associate diverse caratteristiche strutturali e funzionali fondamentali, tra cui un peptide segnale, domini simili alle immunoglobuline, ponti disolfuro, glicosilazione N-linked e nitratazione della tirosina; è stata inoltre descritta un’isoforma secreta.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Poiché l’immunogeno copre l’intera regione extracellulare, è probabile che l’anticorpo riconosca LILRA2 nativo espresso sulla superficie cellulare, rendendolo adatto alla marcatura di cellule vive nella citometria a flusso e nell’immunofluorescenza.
• Per IF/ICC, è necessario ottimizzare le condizioni appropriate di fissazione e permeabilizzazione per preservare l’accessibilità dell’epitopo, in particolare per il rilevamento intracellulare o associato alla membrana.
• Considerato il profilo di espressione riportato, si consiglia di includere controlli appropriati utilizzando tipi cellulari con espressione nota (ad es. monociti del sangue periferico e neutrofili) e tipi cellulari con espressione bassa/assente (ad es. linfociti) per verificare la specificità.
• Il fluoroforo coniugato è compatibile con i comuni canali di rilevamento della fluorescenza rossa; proteggere sempre dalla luce durante la lavorazione.
• Per FC, titolare l’anticorpo per determinare la concentrazione di marcatura ottimale per il tipo specifico di campione, così da ridurre al minimo il fondo e massimizzare il rapporto segnale/rumore.
• Poiché l’anticorpo è stato validato dal fornitore esclusivamente per IF/ICC e FC, le prestazioni in altre applicazioni (ad es. western blotting) devono essere verificate indipendentemente, soprattutto considerando le molteplici isoforme e la potenziale glicosilazione di LILRA2.

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