Anticorpo policlonale di coniglio anti-Pro-Collagene I alfa umano (COL1A1) per WB, IF-P, IHC-P - P02452

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della catena alfa-1(I) del collagene

• La catena alfa-1(I) del collagene, codificata da COL1A1, è la catena pro-alfa1(I) che si assembla con la pro-alfa2(I) per formare il procollagene di tipo I, il principale collagene fibrillare della matrice extracellulare.
• Il collagene di tipo I è un collagene di gruppo I, che forma fibrilli che forniscono resistenza tensile ai tessuti connettivi; è più abbondante nei tendini, nei legamenti e nelle ossa.
• La proteina viene secreta nello spazio extracellulare e subisce mineralizzazione nell'osso, legando l'idrossiapatite di calcio per contribuire alla resistenza ossea.
• Estese modifiche post-traduzionali, tra cui l'idrossilazione dei residui di prolina e lisina, la glicosilazione e la fosforilazione, sono essenziali per la stabilità dell'elica triplice e l'assemblaggio dei fibrilli.
• Le mutazioni in COL1A1 sono collegate all'osteogenesi imperfetta (malattia delle ossa fragili), alla sindrome di Ehlers-Danlos, all'osteoporosi e al nanismo, riflettendo il suo ruolo strutturale critico.
• La proteina matura contiene ripetizioni caratteristiche Gly-X-Y e un propeptide C-terminal legato da ponti disolfuro, con un peptide segnale che dirige la secrezione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre la regione N-terminale (aa 26-161) del COL1A1 umano, mirando al dominio del propeptide; considerare che questa regione può essere clivata nei fibrilli di collagene maturo, potenzialmente influenzando il rilevamento delle forme completamente elaborate.
• Per il western blot (WB), il peso molecolare previsto è di ~138 kDa; a causa dell'esteso reticolazione e delle modifiche post-traduzionali, il peso molecolare osservato può variare; convalidare nel proprio sistema di campione utilizzando controlli positivi appropriati (es. lisati di fibroblasti umani o estratti ossei).
• Per l'immunoistochimica (IHC-P) e l'immunofluorescenza (IF-P), ottimizzare i protocolli di recuperazione dell'antigene e di permeabilizzazione per esporre gli epitopi all'interno della densa matrice extracellulare; considerare la digestione enzimatica per migliorare la penetrazione dell'anticorpo.
• Questo anticorpo è convalidato per la reattività umana; la reattività crociata con altre specie non è caratterizzata; se si utilizzano campioni non umani, eseguire un esperimento pilota per confermare la reattività.

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