Anticorpo monoclonale ABflo 488 Anti-Umano RANKL/CD254 per Citometria a Flusso (Intracellulare) - O14788

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di RANKL/CD254

• RANKL (TNFSF11, TRANCE, OPGL, ODF, CD254) è un membro della superfamiglia dei ligandi del fattore di necrosi tumorale (TNF), espresso sia come citochina legata alla membrana che solubile.
• Funge da fattore chiave per la differenziazione e l'attivazione degli osteoclasti legandosi a TNFRSF11A/RANK e TNFRSF11B/OPG, portando alla traslocazione nucleare di NFATC1 e all'induzione di geni specifici degli osteoclasti. Riferimenti correlati: PMID:22664871
• Oltre al rimodellamento osseo, RANKL potenzia la proliferazione delle cellule T mediata dalle cellule dendritiche e può regolare il cross-talk tra cellule T e cellule dendritiche nelle risposte immunitarie.
• Lo splicing alternativo e la scissione proteolitica generano molteplici isoforme, con pesi proteici osservati di 27, 30 e 35 kDa che riflettono potenziali glicosilazioni e processi di maturazione.
• La localizzazione subcellulare include la membrana cellulare (proteina di membrana a singolo passaggio di tipo II), il citoplasma e una forma secreta, consentendo segnalazione sia giustacrina che paracrina.
• L'espressione tissutale è più alta nei linfonodi periferici, con livelli inferiori in milza, leucociti, midollo osseo, cuore, placenta, muscolo scheletrico, stomaco e tiroide.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (aa 136–317), coprendo la regione di legame del recettore; questo coniugato ABflo 488 è validato per citometria a flusso intracellulare e potrebbe richiedere l'uso di buffer di permeabilizzazione.
• Per rilevare RANKL di superficie su cellule vive, i protocolli di titolazione e quelli senza fissazione dovrebbero essere ottimizzati in modo indipendente, poiché l'anticorpo è generato contro una proteina ricombinante e potrebbe riconoscere sia le forme legate alla membrana che quelle solubili.
• Data la specificità per l'umano, utilizzare campioni di origine umana (es. cellule T attivate, osteoblasti, cellule linfonodali) e confermare la reattività incrociata con controlli appropriati.
• ABflo 488 presenta proprietà spettrali simili ad Alexa Fluor 488; assicurarsi la compatibilità con laser e filtri (eccitazione ~488 nm, emissione ~520 nm) per una rilevazione ottimale del segnale.

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