Anticorpo monoclonale anti-SIGLEC9 umano per citometria a flusso - Q9Y336

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di SIGLEC9

• SIGLEC9 (lectina 9 di tipo Ig legante l'acido sialico) è noto anche come CD329, CDw329 o proteina FOAP-9. Appartiene alla superfamiglia delle immunoglobuline e alla famiglia delle lectine leganti l'acido sialico (siglec).
• Dal punto di vista funzionale, SIGLEC9 agisce come potenziale molecola di adesione che media il legame alle cellule dipendente dall'acido sialico. Si lega preferenzialmente agli acidi sialici legati in posizione alfa-2,3 o alfa-2,6.
• Il sito di riconoscimento dell'acido sialico di SIGLEC9 può essere mascherato attraverso interazioni cis con gli acidi sialici presenti sulla stessa superficie cellulare, il che può regolarne l'attività di legame.
• SIGLEC9 è una proteina di membrana di tipo I a singolo passaggio, localizzata nella membrana plasmatica.
• L'espressione tissutale è massima nei leucociti del sangue periferico, in particolare neutrofili e monociti, ed è stata rilevata anche nel fegato, nel fegato fetale, nel midollo osseo, nella placenta e nella milza. Livelli inferiori sono presenti in vari altri tessuti.
• La proteina contiene due domini di tipo immunoglobulinico (uno di tipo V-set e uno di tipo C2-set), un'elica transmembrana e una coda citoplasmatica. È soggetta a splicing alternativo ed è glicosilata.
• Le principali modifiche post-traduzionali includono ponti disolfuro e glicosilazione N-linked. Il peso molecolare dell'isoforma canonica è di circa 50 kDa, mentre ulteriori isoforme possono essere rilevate a circa 52 kDa.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 18–348 di SIGLEC9 umano, coprendo l'intero dominio extracellulare. Questo design genera generalmente anticorpi in grado di riconoscere SIGLEC9 nativo legato alla membrana.
• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il proprio tipo di campione. Includere controlli isotipici appropriati e una colorazione per cellule vive/morte per garantire la specificità.
• Poiché SIGLEC9 può interagire in cis con gli acidi sialici presenti sulla superficie cellulare, l'epitopo dell'anticorpo può essere parzialmente mascherato sulle cellule intatte. Se si osserva una colorazione debole, considerare il trattamento delle cellule con neuraminidasi (sialidasi) o l'utilizzo di condizioni di lavaggio acido per interrompere il legame cis e migliorare l'accessibilità dell'anticorpo.
• Il coniugato fornisce un segnale brillante e fotostabile, adatto per pannelli di citometria a flusso multicolore. Evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento e proteggere dalla luce per preservare l'integrità del coniugato.

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