Anticorpo monoclonale anti-CD8a umano/scimmia per FC - P01732

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD8a

• CD8A è una glicoproteina transmembrana di tipo I di circa 25,7 kDa, nota anche come Leu-2 o T8/Leu-2, appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline. Esistono molteplici isoforme dovute allo splicing alternativo.
• Funziona come corecettore per il recettore delle cellule T (TCR), legandosi alle molecole MHC di classe I sulle cellule presentanti l'antigene, ed è fondamentale per la selezione timica delle cellule T e per la sorveglianza immunitaria periferica.
• In seguito all'interazione con il TCR, la coda citoplasmatica di CD8A si associa alla chinasi LCK della famiglia Src, avviando cascate di segnalazione che promuovono la produzione di citochine, la citotossicità e la proliferazione delle cellule T.
• Nei linfociti T citotossici (CTL), l'interazione CD8A-MHC di classe I consente il riconoscimento e l'eliminazione delle cellule infettate da virus e delle cellule tumorali.
• CD8A può anche formare omodimeri sulle cellule natural killer (NK), promuovendo la formazione di coniugati, la lisi delle cellule bersaglio e i segnali di sopravvivenza.
• È espresso prevalentemente sulla superficie delle cellule T CD8+ come eterodimero con CD8B; gli omodimeri si trovano in sottopopolazioni di cellule NK, cellule T della memoria, linfociti intraepiteliali, monociti e cellule dendritiche.
• Localizzazione subcellulare: principalmente membrana plasmatica; viene anche secreto in forma solubile in seguito all'attivazione.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la glicosilazione N-linked, la formazione di ponti disolfuro e la palmitoilazione, che influenzano il ripiegamento della proteina e l'ancoraggio alla membrana.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 22–182) del CD8A umano, che dovrebbe riconoscere la forma matura ed esposta sulla superficie del recettore.
• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il proprio tipo cellulare.
• Includere controlli isotipici appropriati e valutare il blocco dei recettori Fc per ridurre il legame aspecifico.
• Validare la reattività crociata con il CD8a del macaco cinomolgo nei propri specifici contesti biologici.
• Tenere presente che gli omodimeri CD8a sulle cellule NK possono richiedere condizioni di colorazione diverse rispetto agli eterodimeri sulle cellule T.

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