Anticorpo Monoclonale Anti-Huntingtina per WB, IF-F, ELISA - P42858

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Huntingtina

• La Huntingtina, nota anche come proteina della malattia di Huntington (proteina HD), è codificata dal gene HTT (indicato anche come HD o IT15) ed è ampiamente espressa, con livelli più alti nel cervello.
• È una proteina grande di circa 348 kDa che può svolgere un ruolo nel trasporto mediato dai microtubuli e nella funzione delle vescicole, promuovendo la formazione di vescicole autofagiche.
• La localizzazione subcellulare include il citoplasma, il nucleo, gli endosomi precoci e gli autofagosomi, riflettendo il suo coinvolgimento nel traffico intracellulare e nell'autofagia.
• Nel cervello, la huntingtina si trova prevalentemente nella corteccia cerebellare, neocorteccia, striato e formazione ippocampale, localizzandosi nelle fibre nervose, varicosità e terminazioni nervose.
• Mutazioni che coinvolgono un'espansione della tripletta CAG nel gene HTT portano alla malattia di Huntington, un disturbo neurodegenerativo autosomico dominante caratterizzato da sintomi motori, cognitivi e psichiatrici.
• Le modificazioni post-traduzionali includono acetilazione, miristoilazione, fosforilazione e coniugazione con ubiquitina, che possono regolarne la funzione e le interazioni.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Essendo un anticorpo monoclonale di coniglio, offre alta specificità e consistenza tra lotti per risultati riproducibili.
• L'immunogeno è un peptide sintetico nella regione N-terminale (aa 1-100), garantendo il riconoscimento della proteina huntingtina a lunghezza intera.
• Per il Western blotting, utilizzare un gel a bassa percentuale (es. 6-8%) per risolvere la grande proteina di ~348 kDa; verificare l'efficienza del transfer con marcatori di peso molecolare appropriati.
• Questo anticorpo è riportato come KO validato, indicando specificità; considerare l'inclusione di controlli appropriati di knockout o knockdown nei propri esperimenti.
• Per l'immunofluorescenza, ottimizzare la fissazione (es. PFA 4%) e la permeabilizzazione (es. Triton X-100 0,1%) può migliorare il rilevamento della huntingtina nei compartimenti citoplasmatici e nucleari.
• Validare la reattività incrociata nei propri campioni specifici, poiché la reattività incrociata tra specie (umana, topo, ratto) si basa sui dati del fornitore; testare nelle proprie condizioni sperimentali.
• Le applicazioni ELISA potrebbero richiedere l'abbinamento con un anticorpo di cattura o di rilevamento; valutare diverse combinazioni e condizioni di rivestimento.

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