Anticorpo policlonale anti-Huntingtin per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P42858

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Huntingtin

• La proteina Huntingtin (HTT), nota anche come proteina HD o IT15, è codificata dal gene HTT ed è il fulcro principale della ricerca sulla malattia di Huntington.
• Huntingtin è una grande proteina di 348 kDa che potrebbe svolgere un ruolo nel trasporto mediato dai microtubuli o nella funzione delle vescicole.
• Promuove la formazione di vescicole autofagiche, contribuendo alle vie di degradazione e riciclo cellulare.
• La localizzazione subcellulare include il citoplasma, il nucleo, l'endosoma precoce e gli autofagosomi, indicando un traffico dinamico.
• Nel cervello, la Huntingtin è altamente espressa nella corteccia cerebrale, nello striato, nella corteccia cerebellare e nella formazione dell'ippocampo; si trova anche nelle fibre nervose, nelle varicosità e nelle terminazioni nervose.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, miristoilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, che possono regolare la sua funzione e le sue interazioni.
• Le mutazioni nell'HTT che coinvolgono l'espansione della tripletta CAG causano la malattia di Huntington, un disturbo neurodegenerativo.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli aa 435-635 della Huntingtin umana (NP_002102.4). Per il Western blot, notare l'elevato peso molecolare (~348 kDa); considerare l'uso di gel di poliacrilamide a bassa percentuale e tempi di trasferimento prolungati per una rilevazione ottimale.
• Essendo un anticorpo policlonale, può riconoscere più epitopi; questo può essere vantaggioso per rilevare le specie di huntingtin a lunghezza intera e troncate, ma si consiglia una validazione specifica per ogni applicazione.
• Per IHC-P e IF/ICC, utilizzare sezioni cerebrali fresche o congelate o incluse in paraffina come controllo positivo, data l'alta espressione nel sistema nervoso centrale. Validare il pattern di colorazione rispetto alle distribuzioni subcellulari note.
• L'anticorpo cross-reattiva con campioni di topo e ratto, ma i livelli di espressione dell'antigene e la stabilità proteica possono variare tra i tessuti e le specie; eseguire esperimenti pilota per confermare l'idoneità.
• Per ELISA, ottimizzare l'antigene di rivestimento e la diluizione dell'anticorpo per ottenere un intervallo di rilevazione lineare.
• Includere sempre controlli negativi (ad es. tessuto da modelli HTT knockout quando disponibili) e verificare la specificità con lisati noti positivi e negativi.

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