Anticorpo policlonale anti-HuR/ELAVL1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q15717

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di HuR/ELAVL1

• HuR/ELAVL1 è una proteina legante l'RNA che riconosce specificamente elementi ricchi di AU (ARE) e motivi poli-U nelle 3'-UTR degli mRNA come FOS e IL3, stabilizzandoli e potenziandone la traduzione. Lega preferenzialmente la sequenza 5'-UUUU[AG]UUU-3'. Riferimenti correlati: PMID:14517288, PMID:18285462, PMID:31358969, PMID:14731398, PMID:17632515, PMID:8626503
• Durante la differenziazione delle cellule staminali embrionali, HuR lega preferenzialmente mRNA non metilati da m6A, stabilizzandoli per promuovere il programma di differenziazione (per analogia).
• HuR lega anche l'mRNA di MYC modificato da m6A, contribuendo alla stabilità dell'oncogene MYC e alla capacità proliferativa (PubMed:32245947). Riferimenti correlati: PMID:32245947
• Aumenta la stabilità dell'mRNA della leptina tramite il legame ARE, collegandola al metabolismo energetico (PubMed:29180010). Riferimenti correlati: PMID:29180010
• HuR effettua uno shuttle tra nucleo e citoplasma e si localizza nei granuli di stress e nei corpi P in risposta allo stress cellulare.
• Espresso ubiquitariamente, HuR viene rilevato nel cervello, nel fegato, nel timo e nei muscoli.
• Le modificazioni post-traduzionali, tra cui fosforilazione, acetilazione e metilazione, regolano la funzione e la distribuzione subcellulare di HuR.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• Per WB, utilizzare lisati di cellule intere da linee cellulari umane o murine che esprimono HuR (ad es. HeLa, HEK293). La dimensione della banda attesa è di circa 36 kDa. Considerare la pre-assorbimento con il peptide immunizzante per confermare la specificità.
• Per IHC-P, validare le condizioni di recupero dell'antigene (tampone citrato o EDTA) in sezioni di tessuto umano o murino note per esprimere HuR, come cervello o fegato. Si raccomanda un passaggio di blocco per ridurre lo sfondo.
• Per IF/ICC, ottimizzare i protocolli di fissazione (ad es. 4% PFA) e permeabilizzazione (ad es. 0,1% Triton X-100). Lo shuttle nucleo-citoplasmatico di HuR può essere influenzato dal trattamento cellulare; includere controlli non trattati.
• Per ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato sia in formato diretto che sandwich. Accoppiarlo con un anticorpo di rilevamento che riconosce un epitopo distante per una sensibilità ottimale.
• Poiché HuR è soggetto a modificazioni post-traduzionali, considerare il contesto biologico nell'interpretazione dei risultati; le forme modificate possono migrare diversamente su SDS-PAGE.

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