Anticorpo policlonale rabbit anti-HUS1 per WB, IF/ICC, IP, ELISA - O60921

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di HUS1

• HUS1 è un componente del complesso checkpoint eterotrimerico 9-1-1, che include anche RAD9 e RAD1, ed è fondamentale per la riparazione del DNA e il controllo dei checkpoint del ciclo cellulare.
  Riferimenti correlati: PMID:21659603
• Il complesso 9-1-1 viene caricato sui siti di danno del DNA dal caricatore di anello RAD17-fattore di replicazione C, dove agisce come piattaforma di anello scorrevole per reclutare e stimolare gli enzimi di riparazione del DNA.
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• HUS1 aumenta l'attività della DNA polimerasi beta (POLB), della flap endonucleasi FEN1 e della DNA ligasi I (LIG1) durante la riparazione dell'escissione basale a tratto lungo.
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• Il complesso 9-1-1 è necessario per il reclutamento di RHNO1 sulle rotture a doppio filamento durante la fase S, indicando un ruolo nella risposta al danno del DNA associato alla replicazione.
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• HUS1 si localizza sia nel nucleo che nel citoplasma, in linea con il suo ruolo di shuttle nella segnalazione del danno al DNA.
• È espresso ubiquitariamente in tutti i tessuti, a conferma del suo ruolo fondamentale nel mantenimento del genoma.
• La proteina subisce splicing alternativo ed è soggetta a identificazione proteomica, come indicato nelle parole chiave di UniProt.
• Con un peso molecolare previsto di ~32 kDa (osservato a 32 kDa), HUS1 è una proteina checkpoint conservata.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno copre i 280 residui N-terminali di HUS1 umano, consentendo il riconoscimento di più epitopi; verificare la specificità per l'isoforma di interesse.
• Per il western blotting è prevista una banda forte a ~32 kDa; utilizzare controlli di caricamento appropriati e validare con lisati positivi e negativi noti.
• Nell'immunoprecipitazione, confermare la formazione del complesso anticorpo-antigene e considerare l'uso di tamponi di lisi a bassa salinità per preservare le interazioni proteiche.
• Per l'immunofluorescenza/ICC, testare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione per ottimizzare la colorazione nucleare e citoplasmatica.
• La reattività crociata con HUS1 murino consente l'uso diretto in sistemi modello roditori; confermare la reattività nella vostra configurazione sperimentale.

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