Anticorpo monoclonale di coniglio anti-ICAM-1/CD54 per WB, IHC-P, FC, ELISA - Q00238

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ICAM-1/CD54

• ICAM-1 (CD54) è una glicoproteina transmembrana appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline, che funge da molecola di adesione cellulare.
• Serve come ligando per le integrine LFA-1 (ITGAL:ITGB2) e MAC-1 (ITGAM:ITGB2), mediando l'adesione leucocita-cellula endoteliale e la migrazione trans-endoteliale.
• Durante l'estravasazione leucocitaria, il legame di ICAM-1 stimola l'assemblaggio della coppa apicale endoteliale tramite ARHGEF26/SGEF e l'attivazione di RHOG.
• Nelle cellule epiteliali, l'interazione di ICAM-1 con MUC1 promuove l'aggregazione cellulare.
• ICAM-1 è localizzata sulla membrana cellulare e presenta molteplici domini simili alle immunoglobuline, un peptide segnale e un'elica transmembrana.
• La proteina subisce modificazioni post-traduzionali tra cui glicosilazione N-legata, formazione di legami disolfuro e ubiquitinazione, che possono regolarne la stabilità e la funzione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione extracellulare (aa 28-493) di ICAM-1 di ratto, che comprende molteplici domini Ig-simili; ciò suggerisce che l'anticorpo possa riconoscere la conformazione extracellulare nativa; considerare questo per applicazioni che richiedono il riconoscimento della struttura nativa (es. FC, ELISA).
• Per il Western blotting (WB), il peso molecolare previsto è di ~60 kDa; verificare la specificità della banda utilizzando lisati appropriati e controlli di caricamento.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), ottimizzare i metodi di recupero dell'antigene poiché ICAM-1 è una proteina di membrana; validare la colorazione in tessuti di ratto rilevanti noti per esprimere ICAM-1 (es. endotelio, tessuti infiammati).
• Per la citometria a flusso (FC), utilizzare la colorazione indiretta con anticorpi secondari appropriati; confermare la reattività con linee cellulari di ratto o cellule primarie.
• Le applicazioni ELISA possono beneficiare della titolazione sia degli anticorpi di cattura che di rilevamento per ottenere rapporti segnale/rumore ottimali.
• È riportata reattività incrociata per il ratto; quando si utilizzano altre specie, validare tramite allineamento di sequenze ed esperimenti pilota.

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