Anticorpo policlonale di coniglio anti-ICAM3 per WB, ELISA - P32942

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di ICAM3

• ICAM3 (Intercellular adhesion molecule 3), designata anche come CD50 o ICAM-R, è una proteina di membrana di tipo I a passaggio singolo e membro della superfamiglia delle immunoglobuline, caratterizzata da molteplici domini simili alle immunoglobuline e ponti disolfuro intramolecolari.
• Funge da ligando primario per l'integrina LFA-1 (ITGAL:ITGB2), svolgendo un ruolo cruciale nell'adesione delle cellule immunitarie e nella fagocitosi dei neutrofili apoptotici da parte dei macrofagi. Riferimenti correlati: PMID:1448173 PMID:1448174 PMID:23775590
• Inoltre, ICAM3 interagisce con l'integrina ITGAD/ITGB2, espandendo il suo repertorio di funzioni di adesione leucocitaria. Riferimenti correlati: PMID:8777714
• Attraverso un meccanismo Ca2+-dipendente e indipendente dall'integrina, ICAM3 si lega a CD209 sulle cellule dendritiche, avviando il clustering tra cellule dendritiche e cellule T e facilitando la proliferazione delle cellule T. Riferimenti correlati: PMID:10721994
• A livello subcellulare, ICAM3 si localizza sulla membrana plasmatica, coerentemente con il suo ruolo negli eventi di contatto diretto cellula-cellula.
• Il suo pattern di espressione è strettamente regolato: è presente costitutivamente solo sui leucociti a riposo ed è assente sulle cellule endoteliali, anche in seguito ad attivazione citochinica. Riferimenti correlati: PMID:8325327 PMID:1448174
• Le modifiche post-traduzionali come la fosforilazione e la glicosilazione possono modulare le proprietà adesive e la segnalazione di ICAM3.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 270–490 all'interno della regione extracellulare di ICAM3 umano, che include domini probabilmente coinvolti nel legame del ligando. Questo design può indurre anticorpi che riconoscono epitopi nativi; tuttavia, la specificità dell'anticorpo dovrebbe essere confermata utilizzando controlli appropriati (ad es. linee cellulari knockout o knockdown).
• Per l'analisi Western blot (WB), si raccomanda di utilizzare lisati proteici da linee cellulari leucocitarie umane o leucociti primari, dove ICAM3 è abbondantemente espresso. È attesa una banda a circa 60 kDa; considerare l'uso di un marcatore di peso molecolare e di un controllo positivo noto.
• Nelle applicazioni ELISA, la natura policlonale di questo anticorpo consente un accoppiamento flessibile (ad es. come anticorpo di cattura o di rilevamento) se combinato con un partner monoclonale adatto. Validare la diluizione ottimale e le condizioni del tampone nel sistema di saggio target.
• Si noti che questo anticorpo è specifico per ICAM3 umano; la reattività crociata con ortologhi di topo o ratto è improbabile sulla base della limitata omologia di sequenza nella regione dell'immunogeno. Se si estende ad altre specie, verificare l'allineamento della sequenza e testare sperimentalmente.

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