Anticorpo policlonale coniglio Anti-ICOS/CD278 per WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y6W8

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ICOS/CD278

• ICOS (Inducible T-cell COStimulator), noto anche come AILIM e CD278, è un recettore stimolatorio espresso sulle cellule T attivate. Appartiene alla famiglia CD28 delle molecole di costimolazione immunitaria e contiene un dominio immunoglobulinico.
• ICOS svolge un ruolo cruciale nelle risposte delle cellule T legandosi al suo ligando ICOSL sulle APC, fornendo segnali di costimolazione che migliorano la proliferazione delle cellule T, la secrezione di citochine (es. IL10) e l'aiuto alla secrezione di anticorpi delle cellule B. Riferimenti correlati: PMID:9930702, PMID:33033255
• È critico per la differenziazione delle cellule T follicolari regolatorie durante le sfide immunitarie come le infezioni virali, agendo tramite la segnalazione PI3K e la modulazione del flusso di calcio indotto dal TCR. Riferimenti correlati: PMID:27135603, PMID:30523347
• ICOS previene l'apoptosi delle cellule T pre-attivate ed è essenziale per interazioni efficienti tra cellule T e B e per il commutamento di classe mediato da CD40 degli isotipi di immunoglobuline.
• A livello subcellulare, ICOS è localizzato sulla membrana cellulare e può anche essere secreto.
• È altamente espresso sulle cellule T tonsillari nei centri germinativi, con livelli inferiori nel timo, polmone, linfonodo e leucociti del sangue periferico, mostrando un modello di espressione tessuto-specifico.
• Le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione e la formazione di legami disolfuro, contribuendo alla sua stabilità strutturale.
• Lo splicing alternativo può generare multiple isoforme, aggiungendo diversità funzionale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (aa 21-140) di ICOS umano, che condivide alta omologia con topo e ratto, supportando la reattività incrociata.
• Per il Western blot, è prevista una banda intorno a 23 kDa (a volte apparendo come un doppione a causa della glicosilazione); considerare l'uso di lisati di controllo positivo da cellule T attivate.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, potrebbe essere richiesta la permeabilizzazione per il rilevamento intracellulare; validare la colorazione in linee cellulari T come Jurkat.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come anticorpo di cattura o di rilevamento; considerare l'abbinamento con altri anticorpi ICOS o proteine di fusione ICOSL-Fc.
• Includere sempre appropriati controlli negativi (es. cellule deficienti in ICOS o peptide di blocco) per confermare la specificità.
• Considerare il test di una gamma di diluizioni partendo da 1:500 per WB e 1:50 per IF, poiché gli anticorpi policlonali possono variare tra i lotti.

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