Anticorpo policlonale Anti-IDH1 per WB, IF/ICC, ELISA - O75874

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di IDH1

• IDH1 codifica per l'isocitrato deidrogenasi citoplasmatica [NADP] (IDPc), che catalizza la decarbossilazione ossidativa dell'isocitrato dipendente da NADP+ in 2-ossoglutarato, una reazione richiesta da enzimi a valle come la fitanoil-CoA diossigenasi. Riferimenti correlati: PMID:10521434 PMID:19935646
• L'enzima produce NADPH, un cofattore fondamentale per numerose vie di biosintesi e la difesa antiossidante, collegandolo all'anabolismo cellulare e all'omeostasi del redox.
• IDH1 si localizza prevalentemente nel citosol e nei perossisomi, e può anche agire come cristallina epiteliale corneale per mantenere la trasparenza corneale (per similarità).
• È un enzima dipendente da metalli che richiede magnesio o manganese per l'attività ed è soggetto ad acetilazione e fosforilazione, come rivelato dagli studi proteomici.
• Come componente chiave del ciclo dell'acido tricarbossilico e della bypass del gliossilato, IDH1 è coinvolto nel metabolismo centrale del carbonio, con mutazioni somatiche comunemente riscontrate in gliomi e leucemia mieloide acuta.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione compresa tra gli amminoacidi 100–200, che è conservata tra uomo, topo, ratto e scimmia; questo supporta l'ampia reattività incrociata tra specie riportata per western blotting (WB) e immunofluorescenza (IF/ICC).
• Per il WB è attesa una banda intorno ai 47 kDa; si consiglia di utilizzare condizioni riducenti e controlli di caricamento in lisati di linee cellulari che esprimono IDH1 (ad esempio HeLa, HepG2).
• Nell'IF/ICC, validare i pattern di localizzazione con marcatori di organelli per confermare la colorazione citosolica e perossisomiale, come indicato in letteratura.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere l'ottimizzazione dell'antigene di rivestimento e della diluizione dell'anticorpo; un ELISA diretto o sandwich con proteina IDH1 ricombinante può essere utilizzato come controllo positivo.
• Si noti che l'anticorpo è policlonale e può presentare variabilità da lotto a lotto; le prestazioni costanti devono essere verificate nel sistema sperimentale pertinente.

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