Anticorpo policlonale coniglio Anti-IDH3A per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P50213

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di IDH3A

• IDH3A codifica la subunità alfa dell'isocitrato deidrogenasi mitocondriale dipendente dal NAD, un enzima chiave del ciclo tricarbossilico (TCA).
• Catalizza la decarbossilazione ossidativa dell'isocitrato in alfa-chetoglutarato, utilizza NAD⁺ come cofattore e richiede ioni bivalenti (Mg²⁺/Mn²⁺) per l'attività.
• L'enzima funziona come eterotetramero: due subunità alfa si combinano con una subunità beta (IDH3B) e una gamma (IDH3G) per formare il complesso completamente attivo; eterodimeri alfa/beta e alfa/gamma mostrano attività basale.
• La proteina si localizza esclusivamente nella matrice mitocondriale, coerente con il suo ruolo nella respirazione cellulare.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione; lo splicing alternativo genera molteplici isoforme.
• Le mutazioni in IDH3A sono legate alla retinite pigmentosa, evidenziando l'importanza dell'integrità del ciclo TCA per la salute retinica.
• Nomi alternativi includono Isocitrica deidrogenasi subunità alfa e subunità alfa ICDH specifica per NAD(+).

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 28–366 dell'IDH3A umano, coprendo una porzione significativa della proteina matura; l'anticorpo è previsto che rilevi sia l'IDH3A endogeno che quello ricombinante.
• Per western blot (WB) si dovrebbe osservare una banda intorno ai 40 kDa (peso molecolare previsto 39,6 kDa); includere controlli positivi appropriati (ad esempio lisati di HeLa, HEK293, tessuti di topo/ratto).
• Nell'immunoistochimica (IHC‑P), ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene (ad esempio tampone citrato, pH 6,0) e validare la specificità del segnale con peptidi di blocco o tessuti da knockout.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), confermare il pattern di colorazione mitocondriale utilizzando una co-colorazione con un marcatore mitocondriale; le condizioni di permeabilizzazione potrebbero richiedere ottimizzazione.
• La reattività crociata con topo e ratto permette studi traslazionali; si raccomanda una validazione indipendente nel sistema di campionamento specifico.
• L'anticorpo è adatto anche per applicazioni ELISA; l'abbinamento con altri anticorpi anti-IDH3A può permettere lo sviluppo di ELISA sandwich.

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