Anticorpo policlonale di coniglio anti-IDH3B per WB, IF, ELISA - O43837

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di IDH3B

• IDH3B (subunità beta mitocondriale dell'isocitrato deidrogenasi [NAD]) è una subunità strutturale del complesso mitocondriale dell'isocitrato deidrogenasi NAD-dipendente, essenziale per il ciclo dell'acido tricarbossilico (TCA).
• Facilita l'assemblaggio e la piena attività enzimatica dell'eterotetramero (2α:1β:1γ), che catalizza la decarbossilazione dell'isocitrato ad α-chetoglutarato, una fase chiave del metabolismo energetico.
• L'eterodimero α/β (IDH3A/IDH3B) mostra un'attività catalitica basale, ma per ottenere la massima attività è necessaria l'interazione cooperativa di entrambi gli eterodimeri α/β e α/γ (IDH3A/IDH3G) all'interno del tetramero intatto.
• IDH3B è localizzata nel mitocondrio e contiene un peptide segnale che ne dirige l'importazione; è soggetta ad acetilazione post-traduzionale.
• Lo splicing alternativo genera più isoforme e le mutazioni in IDH3B sono associate alla retinite pigmentosa, una forma di degenerazione retinica ereditaria.
• La proteina ha un peso molecolare previsto di circa 42 kDa (42.184 Da), coerente con la sua identificazione negli studi di proteomica.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 35–170) esclude il peptide segnale mitocondriale N-terminale, suggerendo che l'anticorpo riconosca probabilmente la forma matura e processata di IDH3B.
• Per il Western blot (WB), prevedere una banda intorno a 42 kDa nei lisati arricchiti in mitocondri; validare con controlli appropriati e prendere in considerazione l'uso di campioni freschi o confezionati con ghiaccio, in conformità alle condizioni di spedizione.
• L'immunofluorescenza (IF) o l'immunocitochimica (ICC) dovrebbero mostrare un pattern di colorazione mitocondriale; la doppia colorazione con marcatori mitocondriali può confermare la specificità.
• Nelle applicazioni ELISA, titolare l'anticorpo per ottimizzare il rapporto segnale/rumore nella quantificazione dell'antigene.
• Data la reattività crociata con topo e ratto, questo anticorpo può essere adatto per studi comparativi tra specie, ma è necessario verificarne le prestazioni nello specifico contesto sperimentale.

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