Anticorpo policlonale di coniglio anti-IFN gamma per WB, ELISA - P01579

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione dell'IFN gamma

• L'interferone gamma (IFN gamma) è un interferone di tipo II, noto anche come interferone immunitario, codificato dal gene IFNG nell'uomo. È secreto principalmente dai linfociti T attivati e dalle cellule natural killer.
• Funziona come una potente citochina nelle risposte antimicrobiche, antivirali e antitumorali, attivando le cellule immunitarie effettrici e potenziando la presentazione dell'antigene. Riferimenti correlati: PMID:16914093 PMID:8666937
• Trasmette segnali attraverso la via JAK-STAT dopo il legame con il suo recettore IFNGR1, determinando l'attivazione di STAT1 e la trascrizione di geni regolati dall'IFN gamma, come IRF1. Riferimenti correlati: PMID:8349687 PMID:16914093
• Potenzia la presentazione dell'antigene MHC di classe I inducendo le subunità dell'immunoproteasoma e l'attivatore PA28, aumentando la quantità e la qualità dei peptidi destinati al caricamento sull'MHC. Riferimenti correlati: PMID:8666937 PMID:8163024 PMID:11112687
• Aumenta l'espressione del complesso MHC di classe II promuovendo molecole chiave come le catepsine B, H e L. Riferimenti correlati: PMID:7729559
• È coinvolto nella regolazione delle cellule staminali ematopoietiche, influenzandone lo sviluppo, la quiescenza e la differenziazione durante l'omeostasi (per similitudine).
• La localizzazione subcellulare è extracellulare, coerentemente con il suo ruolo di citochina. La pro-proteina contiene un peptide segnale e subisce un clivaggio a livello di una coppia di residui basici per generare la forma matura.
• Le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione e la formazione di acido piroglutammico, come indicato dalle parole chiave di UniProt.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende la sequenza matura dell'IFN gamma (aa 24-166) e prende di mira il dominio funzionale; tenere conto di questo aspetto nella progettazione di peptidi bloccanti o saggi di competizione.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di 19 kDa; assicurarsi di utilizzare una percentuale di gel e condizioni di trasferimento adeguate per le proteine a basso peso molecolare.
• Poiché l'IFN gamma è una citochina secreta, la preparazione dei campioni deve considerare la sua presenza nel siero, nel plasma o nei surnatanti di colture cellulari; includere controlli appropriati e inibitori delle proteasi per prevenirne la degradazione.
• Per l'ELISA, questo anticorpo policlonale può essere utilizzato come anticorpo di cattura o di rilevazione; tuttavia, l'abbinamento con un anticorpo monoclonale per un ELISA sandwich può migliorare la specificità.
• Convalidare le prestazioni in campioni biologici pertinenti, ad esempio lisati di linfociti T attivati o PBMC stimolate, per confermare la reattività e stabilire empiricamente le diluizioni di lavoro ottimali.

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