Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-IFNAR1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P17181

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di IFNAR1

• IFNAR1 (Recettore dell'interferone alfa/beta 1), noto anche come membro 1 della classe II dei recettori delle citochine (CRF2-1), forma un recettore eterodimerico con IFNAR2 per gli interferoni di tipo I (IFN-α, IFN-β, IFN-ε, IFN-ω e IFN-κ). Riferimenti correlati: PMID:10049744, PMID:14532120, PMID:15337770

• Al legame dell'interferone, la vicinanza di IFNAR1 e IFNAR2 innesca la fosforilazione incrociata delle chinasi Janus associate (TYK2 su IFNAR1, JAK1 su IFNAR2), la fosforilazione dei residui tirosinici del recettore, il reclutamento e la fosforilazione dei fattori di trascrizione STAT e la loro traslocazione nucleare per regolare l'espressione dei geni stimolati dall'interferone. Riferimenti correlati: PMID:21854986, PMID:32972995, PMID:7665574, PMID:7526154, PMID:19561067

• IFNAR1 può anche agire indipendentemente da IFNAR2 come recettore funzionale per IFNB1, attivando una via di segnalazione non-JAK-STAT.

• La localizzazione subcellulare include la membrana cellulare, gli endosomi tardivi e i lisosomi, in linea con l'internalizzazione e il traffico del recettore.

• I recettori dell'IFN sono espressi in modo ubiquitario. Esistono più isoforme: l'isoforma 1, 2 e 3 sono rilevate nelle cellule di mieloma sensibili all'IFN U266B1, mentre solo le isoforme 2 e 3 si trovano nelle cellule resistenti all'IFN U266R.

• IFNAR1 è un membro della famiglia dei recettori delle citochine di classe II, possedendo ripetizioni di fibronectina di tipo III extracellulari e un'elica transmembrana singola.

• Le modifiche post-traduzionali chiave includono glicosilazione, palmitoilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, insieme alla formazione di legami disolfuro e isopeptidici.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio intracellulare C-terminale (aa 470–557), rendendo l'anticorpo adatto ad applicazioni come il Western blotting (WB) e l'immunoistochimica (IHC) che rilevano l'IFNAR1 totale indipendentemente dal distacco del dominio extracellulare o dallo stato di glicosilazione.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), è necessaria la permeabilizzazione per consentire all'anticorpo l'accesso all'epitopo intracellulare; includere appropriati controlli negativi per verificare la specificità.
• Essendo un anticorpo policlonale, può riconoscere più epitopi, aumentando la sensibilità ma potenzialmente incrementando il fondo; considerare l'ottimizzazione delle condizioni di blocco e lavaggio.
• Confermata reattività crociata con IFNAR1 di topo e ratto, ma l'omologia di sequenza nella regione dell'immunogeno dovrebbe essere verificata; si raccomanda la validazione nel sistema modello rilevante.
• Per le applicazioni ELISA, assicurarsi che l'antigene di ricoprimento corrisponda alla regione dell'immunogeno o alla proteina a lunghezza intera; un formato ELISA sandwich può migliorare il rapporto segnale/rumore.
• Mantenere i lisati cellulari/di tessuto e i reagenti su ghiaccio durante la preparazione per minimizzare la degradazione proteolitica del bersaglio di ~64 kDa.

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