Anticorpo policlonale di coniglio anti-IGF2BP1/IMP1 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9NZI8

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di IGF2BP1/IMP1

• IGF2BP1 (proteina 1 legante l'mRNA del fattore di crescita insulino-simile 2), nota anche come IMP1, ZBP1, CRD-BP e VICKZ1, è una proteina legante l'RNA che recluta i trascritti bersaglio negli mRNP citoplasmatici per controllarne il trasporto, l'immagazzinamento e la traduzione.
• Agisce come lettore della N6-metiladenosina (m6A), legandosi preferenzialmente agli mRNA modificati con m6A e aumentandone la stabilità. Ciò è esemplificato dalla sua interazione con il determinante dell'instabilità della regione codificante dell'mRNA di MYC (CRD), in cui la modifica m6A potenzia il legame, proteggendo il trascritto dal clivaggio endonucleolitico e dalla degradazione mediata dai microRNA. Riferimenti correlati: PMID:29476152 PMID:32245947
• Una funzione ben caratterizzata è il trasporto e la traduzione localizzata dell'mRNA di ACTB (β-actina): IGF2BP1 si lega co-trascrizionalmente all'elemento zipcode di 54 nucleotidi presente nella 3′-UTR di ACTB; l'RNP viene quindi esportato e trasportato lungo il citoscheletro fino alla periferia cellulare. La fosforilazione di IGF2BP1 nella destinazione rilascia l'mRNA per la polimerizzazione locale dell'actina, un processo fondamentale per la migrazione e la polarità cellulare.
• Nei neuroni, IGF2BP1 regola la crescita dei neuriti, la guida del cono di crescita e la migrazione neuronale controllando la sintesi spaziale e temporale di proteine come la β-actina, e può partecipare al trasporto dell'mRNA verso le sinapsi attivate.
• La proteina si sposta tra il nucleo e il citoplasma e si localizza nelle regioni perinucleari, nei P-body, nei granuli da stress e in varie proiezioni cellulari, tra cui lamellipodi, dendriti, coni di crescita, filopodi e assoni.
• IGF2BP1 è espresso prevalentemente nei tessuti embrionali (fegato fetale, polmone, rene, timo) e nelle cellule germinali, ed è frequentemente sovraespresso nei tumori, in accordo con il suo ruolo nel promuovere la stabilità dell'RNA e la motilità cellulare.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il western blot, attendersi una banda intorno a 63 kDa; includere lisati di controllo positivo ottenuti da tessuti o linee cellulari umane, murine o di ratto note per esprimere IGF2BP1 (ad esempio campioni embrionali o cellule tumorali).
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), può essere necessario il recupero antigenico; validare i pattern di colorazione in tessuti con espressione documentata, come il fegato fetale o i campioni tumorali.
• Poiché IGF2BP1 è regolato dalla fosforilazione, verificare se l'epitopo (aa 478–577) possa essere influenzato da modifiche post-traduzionali nel campione.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), prevedere una colorazione citoplasmatica con possibili segnali nucleari o nelle proiezioni cellulari; utilizzare protocolli appropriati di fissazione e permeabilizzazione.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti può variare; riverificare ogni nuovo lotto nel proprio sistema di analisi.

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