Anticorpo Policlonale Anti-IGF2BP3 per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - O00425

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di IGF2BP3

• La proteina 3 legante l'mRNA del fattore di crescita insulino-simile 2 (IGF2BP3), nota anche come IMP3 o KOC, è un membro della famiglia di proteine leganti l'RNA VICKZ ed è codificata dal gene IGF2BP3 (GeneID: 10643) nell'uomo.
• IGF2BP3 agisce come un fattore legante l'RNA che recluta trascritti target in complessi citoplasmatici di messaggero ribonucleoproteina (mRNP), consentendo il trasporto dell'mRNA, l'immagazzinamento temporaneo e la protezione da attacchi endonucleasici o degradazione mediata da microRNA. Riferimenti correlati: PMID:29476152
• Si lega preferenzialmente a mRNA modificati con N6-metiladenosina (m6A), aumentandone la stabilità; ad esempio, stabilizza l'mRNA di CD44 legandosi al suo 3'-UTR (promuovendo l'adesione cellulare e gli invadopodi nel cancro) e l'mRNA di MYC legandosi alla regione determinante l'instabilità del codone (CRD) in modo dipendente da m6A. Riferimenti correlati: PMID:29476152
• IGF2BP3 si lega anche al 5'-UTR degli mRNA del fattore di crescita insulino-simile 2 (IGF2), coinvolgendolo nella regolazione dei fattori di crescita.
• La proteina si localizza nel nucleo, nel citoplasma, nei P-body e nei granuli di stress, riflettendo i suoi ruoli dinamici nelle decisioni sul destino dell'mRNA.
• L'espressione tissutale è prominente nel fegato, polmone, rene, timo, placenta fetali e in vari tumori (es. adenocarcinoma della cervice, testicolare, pancreatico e carcinoma a cellule renali), ed è ampiamente espressa durante lo sviluppo fetale.
• Le modificazioni post-traduzionali includono fosforilazione e coniugazione con ubiquitina (legame isopeptidico), che possono regolarne l'attività o la stabilità.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato corrisponde a una regione (amminoacidi 300–579) distante dai domini canonici di legame all'RNA, potenzialmente minimizzando l'interferenza con il legame del target nelle applicazioni IP o IF.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare atteso è di circa 64 kDa; considerare l'uso di un gel riducente e appropriati marcatori di peso molecolare.
• Nell'IHC-P, la recupero dell'antigene mediante recupero dell'epitopo indotto dal calore (HIER) in tampone citrato o EDTA può migliorare il rilevamento; validare nel sistema campione rilevante.
• Per IF/ICC, la fissazione con paraformaldeide al 4% e la permeabilizzazione con Triton X-100 allo 0,1% sono punti di partenza tipici; la colorazione nucleare e citoplasmatica dovrebbe essere valutata.
• Nell'immunoprecipitazione (IP), confermare la capacità dell'anticorpo di isolare i complessi endogeni di IGF2BP3; ottimizzare la stringenza del tampone di lisi per preservare le interazioni proteina-proteina.
• Le prestazioni ELISA possono essere valutate con formati diretti o sandwich; essendo un anticorpo policlonale, può fungere sia da reagente di cattura che di rilevamento se accoppiato a un opportuno anticorpo monoclonale.
• Notare la reattività crociata con topo e ratto, che indica epitopi conservati; verificare sempre la reattività nella specie di interesse con controlli appropriati.

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