Anticorpo Policlonale Anti-IHH di Coniglio per WB ed ELISA - Q14623

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di IHH

• IHH (proteina Indian hedgehog) è un membro della famiglia hedgehog, codificata dal gene IHH. Il precursore a lunghezza intera subisce scissione autoproteolitica e modificazione colesterolica per generare il morfogeno N-prodotto attivo.
• L'N-prodotto di IHH attiva la via di segnalazione di smoothened legandosi ai recettori patched (PTCH1/2), alleviando l'inibizione di SMO, processo essenziale per lo sviluppo di ossa e cartilagine.
• IHH regola positivamente l'espressione di PTHLH per prevenire l'ipertrofia dei condrociti durante la formazione ossea endocondrale e, indipendentemente, promuove la proliferazione dei condrociti.
• IHH svolge un ruolo nella segnalazione paracrina hedgehog (PMID:24342078) e, quando associata a particelle VLDL, agisce come morfogeno circolante per mantenere l'integrità delle cellule endoteliali (PMID:20839884). Riferimenti correlati: PMID:24342078 PMID:20839884
• Oltre allo sviluppo scheletrico, IHH è coinvolto nello sviluppo dell'epitelio pigmentato retinico, dei fotorecettori e dei tessuti perioculari.
• A livello subcellulare, la proteina risiede nelle membrane del reticolo endoplasmatico e dell'apparato di Golgi; l'N-prodotto secreto può associarsi alla membrana cellulare.
• L'espressione tissutale è osservata nel polmone embrionale e, nell'adulto, nel rene e nel fegato.
• Le modifiche post-traduzionali chiave includono la scissione autocatalitica, l'attacco del colesterolo e la palmitoilazione; la proteina è classificata come glicoproteina e lipoproteina.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 202–411 di IHH umano, coprendo una regione distale dal sito di scissione autocatalitica. La proteina a lunghezza intera ha un peso molecolare previsto di 45 kDa, ma si consideri che IHH endogeno può essere processato, risultando in bande aggiuntive nel WB.
• Per il Western blot, convalidare la specificità dell'anticorpo utilizzando controlli positivi appropriati (es. tessuti o cellule noti per esprimere IHH) e considerare l'uso di un controllo di caricamento. Ottimizzare empiricamente le condizioni di blocco e rilevamento.
• Questo anticorpo policlonale reagisce con IHH umano, di topo e di ratto, rendendolo adatto per studi cross-specie. Tuttavia, confermare la reattività nella specie target se non precedentemente validata.
• Per l'ELISA, la titolazione dell'anticorpo e le concentrazioni ottimali dell'antigene di rivestimento devono essere determinate sperimentalmente.
• Come per qualsiasi reagente policlonale, può verificarsi variabilità tra lotti; si consiglia di riservare uno standard di calibrazione per risultati coerenti.

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