Anticorpo monoclonale di coniglio anti-IKK beta per WB, IP, IF/ICC, ELISA - O14920

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di IKK beta

• Identità proteica: IKK beta (IKBKB) è una proteina chinasi serina/treonina anche nota come IKK-2, NFKBIKB o IKK-beta, ed è una subunità catalitica centrale del complesso chinasi IκB (IKK).
• Segnalazione NF-κB: Svolge un ruolo essenziale nella via canonica di NF-κB, attivata da citochine pro-infiammatorie, patogeni o stress cellulare, portando alla fosforilazione e alla successiva degradazione ubiquitina-dipendente degli inibitori IκB e alla traslocazione nucleare di NF-κB (PubMed:20434986, PubMed:20797629, PubMed:21138416). Riferimenti correlati: PMID:20434986, PMID:20797629, PMID:21138416
• Diversità dei substrati: Oltre a IκB, IKK beta fosforila NEMO/IKBKG, le subunità di NF-κB RELA e NFKB1, e le chinasi correlate a IKK TBK1/IKBKE, fornendo un meccanismo di feedback negativo che previene un'infiammazione eccessiva (PubMed:11297557, PubMed:20410276). Riferimenti correlati: PMID:11297557, PMID:20410276
• Ruoli regolatori aggiuntivi: IKK beta fosforila FOXO3 per inibire l'apoptosi, modifica RIPK1 per sopprimere la morte cellulare indotta da TNF, attiva IRF5 per l'induzione dell'interferone e fosforila STAT1 per promuovere l'espressione genica infiammatoria (PubMed:15084260, PubMed:25326418, PubMed:32209697, PubMed:38621137). Riferimenti correlati: PMID:15084260, PMID:25326418, PMID:32209697, PMID:38621137
• Localizzazione subcellulare: Trovata nel citoplasma, nel nucleo e nei raft di membrana, in linea con il suo ruolo dinamico nella trasduzione del segnale.
• Espressione tissutale: Altamente espressa in cuore, placenta, muscolo scheletrico, rene, pancreas, milza, timo, prostata, testicolo e sangue periferico.
• Rilevanza nelle malattie: Mutazioni in IKBKB sono associate a immunodeficienza combinata grave (SCID) e altri disturbi immunitari, sottolineando il suo ruolo critico nella funzione immunitaria.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli aminoacidi 261-411, mirando a una regione centrale di IKK beta umano. Questo design può riconoscere più isoforme o prodotti di clivaggio, come suggerito dall'ampio intervallo di peso molecolare osservato (29–87 kDa).
• Per il Western blot, convalidare l'anticorpo in linee cellulari umane rilevanti (es. HeLa, Jurkat) e utilizzare appropriati controlli negativi. Considerare l'uso di inibitori delle proteasi durante la lisi per minimizzare la degradazione.
• Nell'immunoprecipitazione (IP), l'anticorpo può precipitare il complesso IKK; confermare la co-precipitazione di NEMO/IKBKG se si studia l'assemblaggio del complesso.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), aspettarsi una colorazione citosolica e nucleare; la localizzazione nei raft di membrana può richiedere protocolli specializzati di fissazione/permeabilizzazione.
• Le applicazioni ELISA dovrebbero utilizzare una curva standard convalidata con proteina ricombinante IKK beta per la quantificazione.

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