Anticorpo policlonale di coniglio Anti-IKKγ per WB, IP, ELISA - Q9Y6K9

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di IKKγ

• IKKγ, noto anche come NEMO o IKBKG, è la subunità regolatoria del complesso canonico chinasi IκB (IKK), essenziale per la segnalazione di NF-κB. Agisce come scaffold che coordina le subunità chinasi IKKα e IKKβ.
• La funzione principale di IKKγ è facilitare la fosforilazione e la successiva degradazione ubiquitina-dipendente degli inibitori di NF-κB (IκBs), rilasciando così NF-κB per la traslocazione nucleare e l'attivazione dei geni bersaglio (PubMed:14695475, PubMed:20724660, PubMed:21518757). Riferimenti correlati: PMID:14695475 PMID:20724660 PMID:21518757
• Riconosce e lega specificamente le catene di poliubiquitina, mostrando un'alta affinità per l'ubiquitina lineare (collegata M1) e collegata Lys-63. Questa capacità di rilevare l'ubiquitina è fondamentale per l'attivazione di IKK a valle dei recettori TNF, IL-1 e Toll-like (PubMed:16547522, PubMed:18287044, PubMed:19033441). Riferimenti correlati: PMID:16547522 PMID:18287044 PMID:19033441
• IKKγ si sposta tra citoplasma e nucleo, contribuendo alle risposte al danno del DNA e alla regolazione trascrizionale.
• La proteina è coinvolta nell'immunità innata antivirale: è essenziale per l'attivazione di IRF3 dopo l'infezione virale (PubMed:19854139) e media le vie TLR3/IFIH1 tramite poliubiquitazione collegata Lys-27 (PubMed:20724660). Riferimenti correlati: PMID:19854139 PMID:20724660
• IKKγ è ampiamente espresso nei tessuti umani, tra cui cuore, cervello, placenta, polmone, fegato, muscolo scheletrico, rene e pancreas.
• Le mutazioni nel gene IKBKG sono collegate a diverse malattie genetiche come l'incontinenza pigmentaria, la displasia ectodermica anidrotica con immunodeficienza e l'osteopetrosi.
• La proteina contiene un dominio a fascio coiled-coil e un dito di zinco C-terminale che media le interazioni proteina-proteina e il legame con l'ubiquitina.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato è una proteina ricombinante che copre quasi interamente IKKγ umano (aa 1-419). Essendo un anticorpo policlonale di coniglio, può riconoscere più epitopi e rilevare varie isoforme o forme modificate post-traduzionali del bersaglio.
• Per il Western blot possono essere osservate più bande (pesi molecolari previsti di 37, 48 e 56 kDa), che potrebbero rappresentare varianti di splicing o specie proteiche modificate. Validare la rilevazione e l'intensità relativa delle bande utilizzando appropriati lisati di controllo positivo e negativo da linee cellulari umane o murine.
• Nell'immunoprecipitazione, le fasi di pre-clearing e le condizioni appropriate del buffer di lisi devono essere ottimizzate, poiché IKKγ è presente in un grande complesso proteico multi-subunità.
• Per applicazioni ELISA, si consiglia di utilizzare una coppia di anticorpi abbinata per cattura e rilevazione, e verificare la sensibilità con IKKγ ricombinante o campioni positivi noti.
• Grazie all'elevata reattività incrociata con il topo, questo anticorpo è adatto per studi su modelli murini, ma va validato nel tessuto o nel tipo cellulare specifico di interesse.

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