Anticorpo monoclonale anti-IL-31 per WB, IF/ICC, ELISA - Q6EBC2

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'IL-31

• L'interleuchina-31 (IL-31) è una citochina secreta che segnala attraverso un complesso recettoriale eterodimerico composto dal recettore dell'oncostatina M (OSMR) e dal recettore A dell'IL-31 (IL31RA) (PubMed:15184896, PubMed:15627637). Riferimenti correlati: PMID:15184896 PMID:15627637
• Al legame del ligando, IL31RA eterodimerizza con OSMR, portando all'attivazione delle chinasi Janus JAK1 e JAK2, che fosforilano i residui di tirosina sulle subunità del recettore, creando siti di attracco per i fattori di trascrizione STAT1, STAT3 e STAT5B (PubMed:15184896, PubMed:15627637). Riferimenti correlati: PMID:15184896 PMID:15627637
• La segnalazione IL-31 attiva anche la via MAPK (ERK1/2) attraverso il reclutamento della proteina adattatrice SHC1 (PubMed:15627637). Riferimenti correlati: PMID:15627637
• Gioca un ruolo critico nell'immunità cutanea, con implicazioni nelle condizioni infiammatorie della pelle (PubMed:15184896). Riferimenti correlati: PMID:15184896
• Migliora la sopravvivenza delle cellule progenitrici mieloidi in vitro e induce l'espressione della resistina-like alfa (RETNLA) e della proteina amiloide A sierica nei macrofagi (Per similarità).
• La localizzazione subcellulare è principalmente secreta, coerente con la sua funzione di citochina.
• Rilevata a bassi livelli in diversi tessuti, tra cui testicolo, midollo osseo, muscolo scheletrico, rene, colon, timo, intestino tenue e trachea.
• Contiene un peptide segnale ed è N-glicosilata; la proteina matura prevista ha un peso molecolare di circa 18,2 kDa.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 24-164 dell'IL-31 umano, corrispondenti alla proteina secreta matura. Questa proteina ricombinante è stata utilizzata come immunogeno, suggerendo che l'anticorpo riconosce la forma nativa processata; considerare l'uso di condizioni denaturanti per il Western blot per garantire lo srotolamento completo, ma verificare le prestazioni in condizioni native per IF/ICC.
• Per il Western blot, è prevista una proteina di circa 18 kDa. Utilizzare un gel SDS-PAGE al 12-15% per una risoluzione ottimale delle proteine a basso peso molecolare e trasferire su membrana di PVDF o nitrocellulosa con porosità di 0,2 µm.
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica, poiché l'IL-31 è secreta, includere un inibitore del trasporto proteico (es. brefeldina A) nel mezzo di coltura prima della fissazione per intrappolare la proteina intracellulare. Validare il pattern di colorazione con appropriati controlli positivi e negativi.
• Per l'ELISA, l'anticorpo monoclonale può essere valutato come reagente di cattura o rilevamento in formato sandwich, abbinato a un altro clone o a un anticorpo policlonale. Testare empiricamente le concentrazioni di rivestimento e le condizioni del tampone ottimali.
• Sebbene validato per l'umano, la reattività crociata con altre specie non è stata riportata; testare la reattività nel proprio sistema modello se si utilizzano campioni non umani.

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