Anticorpo policlonale Anti-IL12A per WB, ELISA - P29459

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di IL12A

• IL12A (subunità alfa dell'interleuchina-12, nota anche come p35, CLMF, NFSK, NKSF1) è una subunità di citochina che forma l'interleuchina-12 (IL-12) bioattiva eterodimerizzandosi con IL12B (p40) e l'interleuchina-35 (IL-35) associandosi a EBI3/IL27B. Riferimenti correlati: PMID:8605935, PMID:8943050
• L'IL-12 è secreta prevalentemente dalle cellule presentanti l'antigene (linfociti B, cellule dendritiche, macrofagi, granulociti) e regola in modo critico le risposte dei linfociti T e delle cellule natural killer (NK), induce la produzione di interferone-gamma (IFN-γ) e promuove la differenziazione dei linfociti T helper 1 (Th1), collegando l'immunità innata e adattativa. Riferimenti correlati: PMID:1673147, PMID:1674604, PMID:8605935
• Il recettore dell'IL-12 è composto dalle subunità IL12R1 e IL12R2; il legame con il ligando attiva la fosforilazione della tirosina e l'attivazione delle chinasi della famiglia JAK TYK2 e JAK2, che a loro volta fosforilano STAT4, determinandone la traslocazione nucleare e la regolazione dei geni bersaglio. Riferimenti correlati: PMID:8943050, PMID:7528775, PMID:7638186
• Come componente dell'IL-35, IL12A media funzioni immunosoppressive essenziali per il mantenimento dell'omeostasi immunitaria epatica, segnala attraverso recettori non convenzionali composti da eterodimeri o omodimeri di IL12RB2 e gp130/IL6ST e richiede in modo esclusivo eterodimeri STAT1–STAT4 per la segnalazione a valle. Riferimenti correlati: PMID:22306691
• IL12A è secretato e subisce modifiche co- e post-traduzionali tra cui glicosilazione e formazione di legami disolfuro, importanti per il corretto ripiegamento e la stabilità dell'eterodimero di IL-12.
• La proteina è altamente conservata tra uomo, topo e ratto, il che la rende un bersaglio adatto per studi su diverse specie.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Questo anticorpo policlonale di coniglio è stato prodotto contro un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 50–150 dell'IL12A umano (NP_000873.2). È previsto che riconosca sia la subunità monomerica di IL12A che, in condizioni non riducenti, l'eterodimero p70 dell'IL-12.
• Per Western blotting è prevista la comparsa di una banda corrispondente alla proteina IL12A di 25 kDa in lisati di tessuti o linee cellulari di uomo, topo e ratto (ad esempio cellule dendritiche attivate, macrofagi). Ottimizzare la preparazione del campione per conservare la forma secreta; includere controlli appropriati.
• Nelle applicazioni ELISA l'anticorpo può essere utilizzato per la cattura o la rilevazione di IL-12 nativo o ricombinante, ma si raccomanda un'attenta titolazione e l'abbinamento con un anticorpo di rilevazione compatibile.
• Data la natura policlonale, la coerenza tra lotti deve essere validata nel sistema sperimentale di riferimento prima di condurre studi su larga scala.

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