Anticorpo monoclonale di coniglio anti-IL1β per WB, ELISA - P10749

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di IL1β

• IL1β, nota anche come interleuchina-1 beta, è una potente citochina pro-infiammatoria appartenente alla famiglia IL-1. Viene inizialmente prodotta come precursore inattivo che richiede una scissione proteolitica per l'attivazione.
• La IL1β matura viene rilasciata nell'ambiente extracellulare attraverso pori di gasdermina-D (GSDMD), un processo legato alla morte cellulare piroptotica, mediando così l'infiammazione a valle dell'attivazione dell'inflammasoma.
• IL1β ha ampie funzioni immunomodulatorie, tra cui l'induzione della febbre (pirogeno endogeno), la promozione dell'attivazione dei linfociti T, la differenziazione Th17 e la produzione di anticorpi da parte dei linfociti B.
• Sinergizza con altre citochine come IL12 per stimolare la produzione di interferone-gamma (IFNG) da parte delle cellule Th1, e con TNF e IL6 per promuovere l'angiogenesi attraverso l'induzione del VEGF.
• A livello subcellulare, IL1β è localizzata nel citoplasma e nel citosol nella sua forma inattiva, mentre la citochina matura viene secreta e può essere trovata anche nei lisosomi e negli esosomi extracellulari.
• L'espressione tissutale è predominante nelle cellule immunitarie attivate come i macrofagi, in linea con il suo ruolo nelle risposte immunitarie innate e adattative.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno per questo anticorpo monoclonale è una proteina di fusione ricombinante corrispondente agli amminoacidi 100–269 di IL1β di topo. Questa regione può contenere epitopi lineari, rendendola adatta per applicazioni come il Western blotting (WB) in condizioni denaturanti.
• Per il WB, considerare l'uso di lisati cellulari totali da macrofagi di topo attivati o altre cellule che esprimono IL1β. Il rilevamento della forma matura di 31 kDa potrebbe richiedere un'appropriata stimolazione per indurre la maturazione e la secrezione.
• In ELISA, l'anticorpo può essere testato come reagente di cattura o di rilevamento. Validarne le prestazioni con proteina ricombinante di IL1β di topo e in campioni biologici come surnatanti di coltura cellulare o siero, assicurando un'appropriata ottimizzazione della diluizione e controlli per gli effetti di matrice.
• Notare che è riportata reattività crociata per IL1β di topo; verificare la reattività nel tipo di campione previsto e considerare le potenziali differenze specie-specifiche se utilizzato in modelli diversi dal topo.

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