Anticorpo monoclonale di coniglio anti-IL1β per WB, IF-P, ELISA - P01584

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di IL-1 beta

• L'interleuchina-1 beta (IL-1β), nota anche come catabolina, è una citochina pro-infiammatoria codificata dal gene IL1B e appartiene alla famiglia delle IL-1.
• Funziona come un importante pirogeno endogeno, inducendo la sintesi di prostaglandine, febbre e risposte infiammatorie sistemiche (PubMed:3920526).
  Riferimenti correlati: PMID:3920526
• Promuove la differenziazione Th17 delle cellule T e sinergizza con IL-12 per stimolare la produzione di IFN-γ da parte delle cellule Th1, collegando l'immunità innata e adattativa (PubMed:10653850).
  Riferimenti correlati: PMID:10653850
• Partecipa all'angiogenesi inducendo l'espressione di VEGF in collaborazione con TNF e IL-6, contribuendo al rimodellamento tissutale e alla progressione tumorale (PubMed:12794819).
  Riferimenti correlati: PMID:12794819
• Svolge un ruolo critico nell'infiammazione mediata da piroptosi: la forma matura viene rilasciata extracellularmente attraverso pori di gasdermina-D in seguito all'attivazione dell'inflammasoma (PubMed:33377178, PubMed:33883744).
  Riferimenti correlati: PMID:33377178 PMID:33883744
• Funge da sensore immunitario innato per l'infezione cutanea da Streptococcus pyogenes; la proteasi batterica SpeB scinde la pro-IL-1β, attivando una risposta infiammatoria protettiva (PubMed:28331908).
  Riferimenti correlati: PMID:28331908
• Si localizza nel citoplasma, nel citosol ed è attivamente secreta; si trova anche nei lisosomi e negli esosomi extracellulari, in linea con il suo rilascio regolato.
• Espressa prevalentemente in monociti e macrofagi attivati, con una regolazione stretta per prevenire la tossicità sistemica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 170-269 di IL-1β umana (NP_000567.1), coprendo la porzione C-terminale della forma pro-. Questa regione è conservata nella citochina matura; l'anticorpo può riconoscere sia il precursore di 31 kDa che la forma matura di 17 kDa nei Western blot denaturanti, a seconda della preparazione del campione.
• Per il Western blotting, considerare l'uso di condizioni riducenti e di un ampio intervallo di peso molecolare per visualizzare le potenziali forme precursori e processate. Convalidare il rilevamento in lisati cellulari pertinenti o in campioni di monociti/macrofagi stimolati.
• L'immunofluorescenza (IF-P) potrebbe richiedere una fissazione e una permeabilizzazione ottimizzate per rilevare IL-1β citosolica. Includere controlli appropriati per distinguere i pool secreti da quelli intracellulari.
• Nelle applicazioni ELISA, questo anticorpo monoclonale può fungere da reagente di cattura o di rilevamento. Per i saggi immunoenzimatici sandwich, si raccomanda l'abbinamento con un secondo anticorpo che riconosca un epitopo distinto.
• Data la potente natura pro-infiammatoria di IL-1β, i sistemi sperimentali dovrebbero includere controlli di stimolazione (ad es., LPS con o senza attivatori dell'inflammasoma) per confermare la specificità del segnale.

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