Anticorpo policlonale di coniglio anti-IL7 per WB, ELISA - P13232

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione dell'IL-7

• L'interleuchina-7 (IL-7) è una citochina ematopoietica fondamentale per lo sviluppo, l'espansione e la sopravvivenza delle cellule T e B naive e della memoria, contribuendo così al mantenimento dell'omeostasi linfoide. Riferimenti correlati: PMID:25870237, PMID:7527823
• L'IL-7 trasmette il segnale attraverso un recettore eterodimerico composto da IL7RA e CSF2RG, determinando l'attivazione delle chinasi JAK1 o JAK3. Riferimenti correlati: PMID:8128231
• La segnalazione a valle comprende le vie PI3K/Akt/mTOR e JAK-STAT5, che promuovono la proliferazione, la sopravvivenza e la differenziazione cellulare. Riferimenti correlati: PMID:18523275, PMID:20974963
• L'IL-7 è una glicoproteina secreta con un peso molecolare previsto di circa 20 kDa, caratterizzata da ponti disolfuro e glicosilazione importanti per la sua stabilità e funzione.
• Il gene umano IL7 genera molteplici isoforme mediante splicing alternativo e le varianti genetiche sono associate a immunodeficienze e condizioni autoimmuni.
• Le parole chiave per IL-7 includono: struttura 3D, splicing alternativo, citochina, variante associata a malattia, ponte disolfuro, glicoproteina, fattore di crescita, secreto, segnale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 26–177 dell'IL-7 umano e che probabilmente genera anticorpi in grado di riconoscere molteplici epitopi. Data la natura policlonale, la coerenza tra diversi lotti deve essere verificata per i saggi critici.
• Per il Western blot (WB), si prevede una banda intorno a 20 kDa in condizioni riducenti. Utilizzare lisati di tessuti o cellule noti per esprimere IL-7, come cellule T attivate o stroma timico. Validare la specificità dell'anticorpo utilizzando un peptide bloccante o IL-7 ricombinante, se disponibile.
• Nelle applicazioni ELISA, prendere in considerazione formati diretti o sandwich con IL-7 umano ricombinante come standard. La reattività crociata dell'anticorpo con l'IL-7 di topo e ratto consente studi comparativi, ma i saggi quantitativi devono essere validati con standard della specie corrispondente.
• Poiché l'IL-7 è un fattore secreto, i surnatanti di colture cellulari o i campioni di siero possono contenere bassi livelli endogeni; per la rilevazione potrebbe essere necessario un arricchimento o una stimolazione, ad esempio con PMA/ionomicina per le cellule T.
• Includere sempre controlli positivi e negativi, come lisati di cellule che sovraesprimono IL-7 o modelli knockout per IL-7, per confermare l'identità della banda.

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