Anticorpo policlonale coniglio anti-IMPDH1 per WB, IF/ICC, ELISA - P20839

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di IMPDH1

• IMPDH1 codifica l'inosina-5'-monofosfato deidrogenasi 1, un enzima chiave che catalizza la conversione limitante della velocità di IMP in XMP nella sintesi de novo dei nucleotidi di guanina, essenziale per la crescita e la proliferazione cellulare.
• Questa proteina mostra anche attività di legame ad acidi nucleici a filamento singolo, suggerendo un possibile coinvolgimento nel metabolismo dell'RNA e/o del DNA oltre al suo ruolo metabolico.
• IMPDH1 è localizzato prevalentemente nel citoplasma ma può essere rilevato anche nel nucleo, indicando una distribuzione subcellulare dinamica.
• Specificità tissutale: il tipo I di IMPDH è l'isoforma principale nei leucociti normali, mentre il tipo II predomina nelle cellule tumorali, collegando l'espressione di IMPDH1 alla differenziazione e alla malignità.
• Il gene subisce splicing alternativo, generando multiple isoforme, ed è classificato sotto la famiglia IMPDH con domini CBS conservati.
• Le associazioni patologiche includono l'amaurosi congenita di Leber (LCA11) e la retinite pigmentosa (RP10), evidenziando ruoli oltre il metabolismo nella salute retinica.
• Le modificazioni post-traduzionali includono la fosforilazione e la metilazione, e la proteina lega ioni metallici come il potassio, con NAD come cofattore per la sua attività ossidoreduttasica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (aa 434-563) di IMPDH1 umano, che può migliorare la specificità; tuttavia, la reattività crociata con isoforme o altri membri della famiglia IMPDH dovrebbe essere validata nel contesto sperimentale.
• Per il Western blot, è prevista una banda a circa 55 kDa; considerare l'uso di un controllo positivo come lisati di cellule HeLa o Jurkat e ottimizzare la diluizione dell'anticorpo primario in base al sistema di rilevamento.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, fissare le cellule con un metodo appropriato (es. PFA al 4%) e permeabilizzare per consentire l'accesso nucleare; notare che possono essere osservati segnali sia citoplasmatici che nucleari.
• Per le applicazioni ELISA, l'immunogeno ricombinante può servire come antigene di rivestimento per valutare il legame dell'anticorpo; titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale.

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