Anticorpo policlonale anti-recettore dell'insulina per WB, ELISA - P06213

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione del recettore dell'insulina

• Il recettore dell'insulina (IR) è una tirosin-chinasi recettoriale che media le molteplici azioni dell'insulina, tra cui la regolazione dell'assorbimento del glucosio, della crescita cellulare e della differenziazione.
• In seguito al legame con l'insulina, l'IR fosforila i substrati del recettore dell'insulina (IRS1-4) e SHC, attivando la via PI3K-AKT per gli effetti metabolici e la via Ras-MAPK per l'espressione genica e la crescita cellulare.
• L'IR esiste in due isoforme (Lunga e Corta) generate da splicing alternativo; l'isoforma Corta ha una maggiore affinità per IGF2 e i recettori ibridi con IGF1R mostrano sensibilità distinte ai ligandi. Riferimenti correlati: PMID:12138094 PMID:16831875
• Il recettore è localizzato sulla membrana cellulare e, in seguito all'attivazione, viene internalizzato negli endosomi tardivi e nei lisosomi.
• Le modifiche post-traduzionali includono autofosforilazione, glicosilazione e formazione di legami disolfuro; è una glicoproteina dotata di attività tirosin-chinasica.
• È espresso principalmente nei tessuti responsivi all'insulina (fegato, tessuto adiposo, muscolo scheletrico), ma anche in molti altri tessuti; la sovraespressione è osservata in diversi tumori.
• Le mutazioni di INSR sono associate al diabete mellito e a gravi sindromi di insulino-resistenza.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, considerare che il recettore dell'insulina viene processato in subunità α (~135 kDa) e β (~95 kDa), determinando più bande a seconda delle condizioni riducenti e della preparazione del campione.
• Validare la reattività dell'anticorpo nel tipo specifico di campione (ad es. lisati cellulari, estratti tissutali) utilizzando controlli positivi e negativi appropriati, poiché il peso molecolare previsto del precursore non processato è di circa 156 kDa.
• Per l'ELISA, titolare l'anticorpo contro il recettore dell'insulina ricombinante o il recettore nativo per ottimizzare le concentrazioni di lavoro e includere la validazione della reattività crociata per i campioni di topo e ratto, come indicato.
• Poiché l'immunogeno è un frammento ricombinante (aa 475-570), l'anticorpo può riconoscere sia le forme precursori sia quelle processate; se necessario, confermare la specificità mediante competizione con peptide o modelli di knockdown/knockout.

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