Anticorpo Policlonale Coniglio Anti-Recettore dell'Insulina per WB, IP, ELISA - P06213

Specifiche Principali del Prodotto e Parametri

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del Recettore dell'Insulina

• Il recettore dell'insulina (INSR) è un recettore tirosin chinasi che innesca cascate di segnalazione intracellulare al legame dell'insulina, regolando i processi metabolici e mitogenici.
• Il legame dell'insulina attiva la fosforilazione dei substrati del recettore dell'insulina (IRS1-4) e degli adattatori (SHC, GAB1), portando all'attivazione della via PI3K-AKT/PKB (azioni metaboliche) e della via Ras-MAPK (crescita e differenziazione cellulare).
• La via PI3K-AKT promuove l'assorbimento di glucosio tramite il trasloco di SLC2A4/GLUT4 e regola l'espressione degli enzimi gluconeogenici/lipogenici attraverso i fattori di trascrizione FOXO; attiva anche mTORC1 per controllare la sintesi proteica e la crescita cellulare.
• INSR esiste come due isoforme generate da splicing alternativo (Lunga e Corta); l'isoforma Corta mostra un'affinità più elevata per IGFII. I recettori ibridi con IGF1R possono legare IGF1 e IGF con affinità variabili.
• I recettori ibridi composti da IGF1R e l'isoforma Lunga di INSR sono attivati con alta affinità da IGF1 ma non in modo significativo dall'insulina (PubMed:12138094). Riferimenti correlati: PMID:12138094
• Al contrario, studi mostrano che i recettori ibridi di entrambe le isoforme mostrano caratteristiche di legame simili, legando ciascuno IGF1 con bassa affinità per l'insulina (PubMed:16831875). Riferimenti correlati: PMID:16831875
• INSR è prevalentemente localizzato sulla membrana cellulare e attraversa gli endosomi tardivi e i lisosomi, in linea con il suo ruolo nella trasduzione del segnale e nel riciclaggio del recettore.
• L'espressione tissutale è più alta nei tessuti bersaglio dell'insulina (fegato, tessuto adiposo, muscolo scheletrico) e viene rilevata anche in vari altri tessuti; il recettore è frequentemente sovraespresso nei tumori, inclusi carcinomi mammari, del colon e del polmone.
• INSR viene sintetizzato come pro-recettore e subisce clivaggio proteolitico nelle subunità α e β; è ulteriormente regolato da fosforilazione, legami disolfuro, S-nitrosilazione e ubiquitinazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1281-1382 nella regione C-terminale di INSR umano (NP_000199.2). Si consiglia di verificare la specificità contro questo epitopo utilizzando saggi di competizione peptidica se necessario.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di ~156 kDa (pro-recettore); tuttavia, in condizioni riducenti, è possibile rilevare anche le subunità elaborate α (~135 kDa) e β (~95 kDa). Ottimizzare la preparazione del campione di conseguenza.
• L'anticorpo presenta reattività crociata con INSR umano, di topo e di ratto come indicato; validare la reattività nel proprio sistema sperimentale specifico utilizzando controlli positivi e negativi.
• Nell'immunoprecipitazione, utilizzare una concentrazione appropriata di anticorpo e garantire un'eluzione efficiente per preservare le interazioni proteiche per l'analisi a valle.
• Le applicazioni ELISA potrebbero richiedere la titolazione dell'anticorpo e delle condizioni del saggio; considerare l'uso di standard noti per la calibrazione.

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