Anticorpo monoclonale Anti-Integrina alfa 5 (ITGA5/CD49e) coniugato per FC - P08648

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di ITGA5/CD49e

• L'Integrina alfa-5 (ITGA5) è una proteina transmembrana di tipo I, nota anche come CD49e, catena alfa VLA-5 e subunità alfa del recettore per la fibronectina.
• ITGA5 si accoppia con l'integrina beta-1 (ITGB1) per formare il recettore per la fibronectina, che si lega alla sequenza RGD nella fibronectina e nel fibrinogeno, mediando l'adesione cellulare e la segnalazione (PubMed:18635536, PubMed:25398877, PubMed:33962943).
  Riferimenti correlati:
  PMID:18635536 PMID:25398877 PMID:33962943
• Il complesso ITGA5:ITGB1 agisce anche come recettore per la fibrillina-1 (FBN1) e media l'adesione cellulare dipendente da RGD a FBN1 (PubMed:12807887, PubMed:17158881).
  Riferimenti correlati:
  PMID:12807887 PMID:17158881
• ITGA5:ITGB1 è coinvolto nella segnalazione delle citochine, funzionando da recettore per IL1B (tramite ITGA5:ITGB1) e CD40LG solubile (tramite ITGA5:ITGB3) (PubMed:29030430, PubMed:31331973).
  Riferimenti correlati:
  PMID:29030430 PMID:31331973
• Nelle interazioni tra patogeno e ospite, ITGA5:ITGB1 funziona come recettore per il metapneumovirus umano e la proteina Tat dell'HIV-1, facilitando l'ingresso virale o l'angiogenesi.
• Subcellularmente, ITGA5 si localizza sulla membrana cellulare e nelle giunzioni cellulari, in particolare nelle adesioni focali, dove collega la matrice extracellulare al citoscheletro di actina.
• Modificazioni post-traduzionali: ITGA5 subisce una clivaggio su una coppia di residui basici per produrre catene pesante e leggera; è inoltre N-glicosilato e fosforilato, modificazioni che possono regolarne l'attività.
• Secondo UniProt, ITGA5 è espressa a livello proteico nella placenta, ma può essere presente anche in altri tessuti.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno utilizzato copre gli amminoacidi da 42 a 995, comprendendo quasi l'intero dominio extracellulare. Questo anticorpo è probabilmente in grado di riconoscere la conformazione nativa, risultando quindi adatto alla rilevazione di ITGA5 sulla superficie cellulare in citometria a flusso.
• L'anticorpo è direttamente coniugato ad , un fluoroforo ad alta luminosità, eliminando la necessità di colorazione secondaria e riducendo il fondo. Ottimizza la concentrazione dell'anticorpo mediante titolazione nella linea cellulare o nel campione di tuo interesse.
• Verifica la reattività sia in sistemi umani che murini, dato che è indicata una reattività crociata. Includi controlli positivi e negativi appropriati (ad esempio, cellule note per esprimere integrina α5 e un controllo isotipo) nel tuo pannello per FC.
• Per le fasi di fissazione e permeabilizzazione, verifica se l'anticorpo riconosce l'epitopo denaturato; in caso contrario, si consiglia la colorazione di superficie.
• Poiché l'integrina α5 è coinvolta nell'adesione e nella segnalazione, valuta l'utilizzo di questo anticorpo in combinazione con saggi funzionali per correlare l'espressione superficiale con l'attività.

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