Anticorpo policlonale di coniglio Anti-INTS4 per WB, IP, ELISA - Q96HW7

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della subunità 4 del complesso Integratore

• La subunità 4 del complesso Integratore (INTS4, nota anche come INT4, MST093) è una componente chiave del complesso integratore, un grande complesso multiproteico che regola la terminazione della trascrizione da parte dell'RNA polimerasi II (Pol II) nella regione prossimale al promotore dei geni. Riferimenti correlati: PMID:29471365, PMID:33243860, PMID:33548203
• Il complesso integratore agisce come punto di controllo di qualità durante l'allungamento della trascrizione, determinando la terminazione precoce dei trascritti con configurazioni sfavorevoli. Questo risultato è ottenuto tramite la defosforilazione del dominio C-terminale (CTD) della Pol II e di SUPT5H/SPT5, il taglio endonucleolitico dell'RNA nascente e la promozione del rilascio della Pol II dal DNA. Riferimenti correlati: PMID:33243860, PMID:38570683
• Oltre al suo ruolo nella terminazione dei trascritti codificanti, il complesso integratore è essenziale per il processamento dell'estremità 3' di diversi RNA non codificanti, inclusi gli RNA enhancer (eRNA), gli RNA nucleari piccoli (snRNA), gli RNA della telomerasi e gli RNA lunghi non codificanti (lncRNA). Riferimenti correlati: PMID:16239144
• INTS4 svolge la funzione di scaffold strutturale all'interno del complesso, facilitando l'interazione tra INTS9 e INTS11, che sono fondamentali per le funzioni catalitiche del complesso. Riferimenti correlati: PMID:29471365, PMID:33548203
• INTS4 media anche il reclutamento della dineina citoplasmatica all'involucro nucleare, un processo che coinvolge probabilmente il complesso integratore, evidenziando il suo potenziale ruolo nel trasporto nucleocitoplasmatico. Riferimenti correlati: PMID:23904267
• La proteina è localizzata prevalentemente nel nucleo ma viene rilevata anche nel citoplasma, in linea con i suoi ruoli dinamici nella regolazione della trascrizione e nella dinamica dell'involucro nucleare.
• Le modifiche post-traduzionali di INTS4 includono l'acetilazione e la coniugazione con proteine simili all'ubiquitina (Ubl), e la proteina va incontro a splicing alternativo per generare molteplici isoforme.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-270) di INTS4 umano. Per confermare la specificità per il bersaglio, si consiglia di eseguire esperimenti di blocco o una validazione con la proteina INTS4 ricombinante.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto di INTS4 endogena è di ~108 kDa. È necessario includere un controllo di caricamento appropriato (ad esempio GAPDH o β-actina) per garantire un caricamento uguale.
• Questo anticorpo è validato per WB, IP e ELISA. Negli esperimenti di IP, il preclearing e l'ottimizzazione del rapporto anticorpo/lisato possono migliorare il rapporto segnale/rumore. Per l'ELISA, si consiglia di utilizzare questo anticorpo policlonale come reagente di cattura o di rilevazione con un'attenta titolazione.
• La reattività crociata con gli ortologhi di topo e ratto è riportata, ma è necessario validare l'anticorpo nel tuo specifico sistema modello e nella tua applicazione prima di eseguire esperimenti su larga scala.

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