Anticorpo policlonale di coniglio anti-INTS8 per WB, ELISA - Q75QN2

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di INTS8

• INTS8 (subunità 8 del complesso integratore), noto anche come proteina kaonashi-1, è un componente centrale del complesso integratore, un complesso multisubunità che termina la trascrizione della RNA polimerasi II (Pol II) nelle regioni prossimali ai promotori. Riferimenti correlati: PMID:28542170 PMID:33243860 PMID:34004147
• INTS8 è specificamente necessario per il reclutamento della protein fosfatasi 2A (PP2A) al checkpoint di pausa e rilascio della trascrizione, una fase critica del controllo di qualità durante l'elongazione. Riferimenti correlati: PMID:32966759 PMID:33243860 PMID:34004147
• Il complesso integratore termina la trascrizione attraverso tre attività enzimatiche coordinate: la defosforilazione del CTD di Pol II e SUPT5H, il taglio endonucleolitico dell'RNA nascente e il rilascio del DNA da parte della polimerasi. Riferimenti correlati: PMID:33243860 PMID:34004147 PMID:38570683
• Oltre alla sintesi dell'mRNA, l'integratore contenente INTS8 termina anche la trascrizione di prodotti non codificanti della Pol II, inclusi gli RNA degli enhancer (eRNA), i piccoli RNA nucleari (snRNA), gli RNA della telomerasi e gli RNA lunghi non codificanti (lncRNA). Riferimenti correlati: PMID:16239144
• INTS8 è localizzato nel nucleo ed è presente sui cromosomi, in linea con il suo coinvolgimento diretto nella regolazione della trascrizione.
• La proteina contiene motivi di ripetizione tetratricopeptidica (TPR), che probabilmente mediano le interazioni proteina-proteina essenziali per l'assemblaggio del complesso integratore.
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme di INTS8 e la proteina è soggetta a fosforilazione; le varianti patogenetiche di INTS8 sono associate a disabilità intellettiva.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 600-800 di INTS8 umano, una regione contenente ripetizioni TPR che può essere accessibile in condizioni denaturanti, supportandone l'uso nel Western blotting (WB).
• Per il WB, si consiglia di utilizzare lisati cellulari totali provenienti da linee cellulari umane o murine; validare la specificità dell'anticorpo con INTS8 ricombinante o con controlli di knockdown/knockout nel proprio sistema sperimentale.
• Questo anticorpo policlonale può essere utilizzato per la rilevazione di INTS8 mediante ELISA; l'abbinamento con un anticorpo di rilevazione compatibile può migliorare la sensibilità e l'intervallo dinamico.
• Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo e le condizioni di incubazione in base al tipo di campione e all'applicazione specifici, poiché le prestazioni possono variare in funzione dell'abbondanza del bersaglio e della matrice.

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