Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Involucrina per WB - P07476

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'Involucrina

• L'Involucrina è un componente principale dell'involucro cellulare corneificato (CE), una struttura insolubile che si forma sotto la membrana plasmatica dei cheratinociti terminalmente differenziati negli epiteli squamosi stratificati.
• La proteina è ricca di residui di glutammina e lisina che fungono da substrati per il reticolo mediato dalle transglutaminasi, cementando il CE alle proteine strutturali intracellulari.
• L'Involucrina funge da impalcatura iniziale nell'assemblaggio del CE, fornendo un modello per l'aggiunta sequenziale di altri precursori come la loricrina e le SPRR.
• Codificata dal gene IVL, appartiene a una famiglia di proteine precursori dell'involucro fondamentali per la barriera meccanica e chimica dell'epidermide.
• A livello subcellulare, l'involucrina è citoplasmatica durante la differenziazione precoce, per poi essere rapidamente reticolata a livello della membrana plasmatica durante la cheratinizzazione terminale.
• La sua espressione è strettamente limitata ai cheratinociti soprabasali dell'epidermide e di altri epiteli squamosi stratificati, inclusa la mucosa orale, esofagea e cervicale.
• Le modifiche post-traduzionali chiave includono i legami isopeptidici catalizzati dalle transglutaminasi e la lipazione, entrambi essenziali per l'insolubilità dell'involucro.
• La proteina è classificata sotto le parole chiave UniProt: Citoplasma, Sequenziamento proteico diretto, Legame isopeptidico, Cheratinizzazione, Lipoproteina, Identificazione proteomica, Proteoma di riferimento, Ripetizione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde ai residui 100–200 dell'Involucrina umana, una regione probabilmente esposta al solvente nella proteina nativa; considerare l'uso del recupero dell'antigene in IHC per esporre gli epitopi reticolati.
• Per il western blot, la banda osservata può apparire intorno a 68 kDa, ma si noti che l'involucrina può formare aggregati ad alto peso molecolare a causa della reticolazione; si raccomandano condizioni riducenti e lisati freschi.
• Le prestazioni dell'ELISA possono essere migliorate utilizzando una strategia di rivestimento con peptide che rispecchi l'immunogeno lineare; in caso di sviluppo di un saggio sandwich, abbinare a un anticorpo di rilevamento che riconosca un epitopo distinto.
• È stata osservata reattività crociata con il ratto; convalidare nel contesto del tessuto e della specie previsti, poiché la conservazione dell'epitopo può variare.
• In IHC-P, la colorazione per l'involucrina è attesa negli strati spinosi superiori e granulari dell'epidermide; utilizzare controlli positivi appropriati (pelle, mucosa orale) e negativi (epitelio non cheratinizzante).

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