Anticorpo Policlonale Anti-IRAK1 per WB, IF/ICC, ELISA - P51617

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di IRAK1

• IRAK1 (chinasi 1 associata al recettore dell'interleuchina-1) è una serina/treonina chinasi essenziale per l'avvio delle risposte immunitarie innate, agendo come mediatore chiave nelle vie di segnalazione del recettore Toll-like (TLR) e del recettore IL-1.
• In seguito all'attivazione di TLR/IL-1R, IRAK1 viene rapidamente reclutata da MYD88, fosforilata da IRAK4 e subisce autofosforilazione, il che innesca eventi di segnalazione a valle.
• IRAK1 fosforila le ligasi E3 ubiquitina Pellino (PELI1, PELI2, PELI3), promuovendo la poliubiquitinazione di IRAK1 stessa, portando al reclutamento del complesso IKK e alla successiva traslocazione nucleare di NF-kB.
• Fosforila anche TIRAP per promuoverne l'ubiquitinazione e la degradazione, e fosforila direttamente IRF7 per guidare la produzione di interferone di tipo I, stabilendo uno stato antivirale.
• La localizzazione subcellulare include citoplasma, nucleo e gocce lipidiche; la sumoilazione di IRAK1 facilita la traslocazione nucleare dove fosforila STAT3.
• Esistono due isoforme principali: l'isoforma 1 è espressa più fortemente dell'isoforma 2, entrambe presenti in modo ubiquitario nei tessuti umani.
• IRAK1 è coinvolta nelle interazioni ospite-virus e subisce varie modificazioni post-traduzionali tra cui fosforilazione, ubiquitinazione e sumoilazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 424-633 di IRAK1 umano, una regione conservata tra uomo, topo e ratto, supportando la reattività incrociata osservata.
• Per il Western blot, considerare l'uso di lisati cellulari totali da cellule immunitarie stimolate con TLR/IL-1R (es. THP-1, RAW264.7) per rilevare bande dipendenti dall'attivazione vicino a 77 kDa; l'espressione basale può variare.
• Negli esperimenti IF/ICC, ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione; IRAK1 endogena può localizzarsi sia nel citoplasma che nel nucleo a seconda del tipo cellulare e della stimolazione.
• Per l'ELISA, l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento accoppiato (es. contro un diverso epitopo) può migliorare la sensibilità; validare nella matrice del campione rilevante.
• Essendo un anticorpo policlonale, è possibile una variabilità da lotto a lotto; includere controlli positivi (es. cellule stimolate) e negativi in ogni saggio.

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