Anticorpo policlonale di coniglio Anti-IRF3 (IIAE7) per WB e ELISA - Q764M6

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di IRF3

• IRF3 è un regolatore trascrizionale chiave delle risposte immunitarie dipendenti da interferoni di tipo I e svolge un ruolo fondamentale nell'immunità innata contro i virus DNA e RNA.
• Regola la trascrizione dei geni dell'IFN di tipo I (IFN-alfa e IFN-beta) e dei geni stimolati dall'interferone (ISG) legandosi all'elemento di risposta stimolato dall'interferone (ISRE) nei loro promotori.
• Nelle cellule non infettate, IRF3 si trova in forma inattiva nel citoplasma; dopo l'infezione virale o la segnalazione TLR, viene fosforilato dalle chinasi IKBKE e TBK1, portando alla dimerizzazione e alla traslocazione nucleare.
• Nel nucleo, IRF3 si associa alla proteina legante CREB (CREBBP) per formare il fattore 1 attivato da dsRNA (DRAF1), un complesso che attiva la trascrizione dei geni dell'IFN di tipo I e dei geni ISG.
• IRF3 può attivare programmi distinti di espressione genica nei macrofagi e indurre una apoptosi significativa nei macrofagi primari.
• IRF3 si localizza nel citoplasma, nel nucleo e nel mitocondrio ed è soggetto a modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione, acetilazione e ubiquitinazione, come indicato dalle parole chiave.
• È coinvolto nella difesa antivirale e nelle interazioni ospite-virus e contiene un dominio di legame al DNA fondamentale per l'attivazione trascrizionale.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico compreso negli amminoacidi 1-100 della regione N-terminale di IRF3 di Sus scrofa; è riportata la reattività crociata con IRF3 umano. Verificare la reattività nel proprio sistema di campioni specifico.
• Per Western blot (WB), si consiglia di utilizzare lisati cellulari totali da cellule umane o suine e convalidare la specificità dell'anticorpo con appropriati controlli di knockdown o overespressione. Il peso molecolare previsto è di 47 kDa, anche se la migrazione osservata può variare.
• Per ELISA, si consiglia di ricoprire con il peptide immunogeno o la proteina IRF3 ricombinante; eseguire una titolazione per determinare la concentrazione ottimale dell'anticorpo.
• Come anticorpo policlonale, può riconoscere più epitopi, aumentando potenzialmente la sensibilità per le applicazioni di rilevamento.

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