Anticorpo Policlonale Anti-IRF3 per WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA, ChIP - Q14653

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di IRF3

• IRF3 è un regolatore trascrizionale chiave delle risposte immunitarie dipendenti dall'interferone di tipo I (IFN), svolgendo un ruolo critico nell'immunità innata contro virus a DNA e RNA. Riferimenti correlati: PMID:22394562, PMID:24049179, PMID:25636800
• Regola la trascrizione dei geni dell'IFN di tipo I (IFN-alfa e IFN-beta) e dei geni stimolati dall'IFN (ISG) legandosi a un elemento di risposta stimolato dall'interferone (ISRE) nei loro promotori. Riferimenti correlati: PMID:11846977, PMID:16846591, PMID:16979567
• IRF3 è un attivatore più potente del gene IFN-beta (IFNB) rispetto al gene IFN-alfa (IFNA) e svolge un ruolo critico sia nelle fasi precoci che tardive dell'induzione genica IFNA/B. Riferimenti correlati: PMID:16846591, PMID:16979567, PMID:20049431
• Trovato in forma inattiva nel citoplasma di cellule non infette; in seguito a infezione virale, presenza di RNA a doppio filamento (dsRNA) o segnalazione del recettore Toll-like (TLR), viene fosforilato dalle chinasi IKBKE e TBK1, inducendo un cambiamento conformazionale che porta a dimerizzazione e localizzazione nucleare. Riferimenti correlati: PMID:22394562, PMID:25636800, PMID:27302953
• Nel nucleo, IRF3 si associa alla proteina legante CREB (CREBBP) per formare il fattore 1 attivato da dsRNA (DRAF1), un complesso che attiva la trascrizione dei geni dell'IFN di tipo I e degli ISG. Riferimenti correlati: PMID:16154084, PMID:27302953, PMID:33440148
• In risposta all'infezione da virus Sendai, IRF3 viene reclutato al mitocondrio e forma un complesso apoptotico TOMM70:HSP90AA1:IRF3:BAX, inducendo apoptosi. Riferimenti correlati: PMID:25609812
• Esresso costitutivamente in una varietà di tessuti.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione (critica per l'attivazione), acetilazione e ubiquitinazione; lo splicing alternativo genera isoforme aggiuntive.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 100–200 di IRF3 umano (NP_001184051.1), una regione all'interno del dominio di legame al DNA N-terminale; considerare l'uso di questa regione per esperimenti di mappatura epitopica o di blocco.
• In Western blot, è attesa una banda a circa 47 kDa; convalidare in linee cellulari infettate da virus rilevanti o stimolate con IFN per confermare l'espressione.
• È riportata reattività incrociata con IRF3 di topo e ratto; verificare l'omologia di sequenza nella regione dell'immunogeno se si utilizzano queste specie.
• Per applicazioni ChIP, ottimizzare le condizioni di reticolazione e sonicazione a causa del trasporto dinamico nucleo-citoplasmatico di IRF3.
• Per IF/ICC, utilizzare metodi appropriati di fissazione e permeabilizzazione per rilevare sia la localizzazione citoplasmatica che nucleare.

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