Anticorpo monoclonale coniglio anti-IRF5 per WB, IP, ELISA - Q13568

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione dell'IRF5

• Il fattore di regolazione dell'interferone 5 (IRF5) è un fattore di trascrizione codificato dal gene IRF5 (noto anche come SLEB10). Appartiene alla famiglia IRF e contiene un dominio di legame al DNA che riconosce gli elementi di risposta stimolati dall'interferone (ISRE).
• L'IRF5 funge da regolatore centrale dell'immunità innata, attivando l'espressione di interferoni di tipo I (IFN-α e IFN-β) e citochine infiammatorie in risposta ai recettori Toll-like endosomiali TLR7, TLR8 e TLR9. Riferimenti correlati: PMID:11303025 PMID:15695821 PMID:22412986
• Guida la trascrizione dei geni stimolati dall'interferone (ISG) legandosi agli ISRE nei loro promotori, amplificando così le risposte antivirali.
• L'IRF5 è critico per la risposta all'interferone durante l'infezione da SARS-CoV-2, in quanto regola l'espressione di effettori antivirali. Riferimenti correlati: PMID:33440148
• La localizzazione subcellulare dell'IRF5 è regolata dinamicamente; si sposta tra il citoplasma e il nucleo, con la translocazione nucleare essenziale per la sua attività trascrizionale.
• Le modifiche post-traduzionali, inclusa la fosforilazione, l'ubiquitinazione (legame isopeptidico) e la coniugazione simile all'ubiquitina, modulano la stabilità e l'attività dell'IRF5.
• Lo splicing alternativo genera multiple isoforme, contribuendo alla diversità funzionale e alla regolazione specifica dei tessuti.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio di legame al DNA N-terminale (aa 6-151) dell'IRF5 umano, suggerendo che l'anticorpo potrebbe riconoscere questa regione funzionale; tenere conto di ciò nella progettazione di esperimenti di mappatura degli epitopi.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto dell'IRF5 è di circa 56 kDa; assicurare un'adeguata separazione e utilizzare controlli appropriati per confermare l'identità della banda.
• L'espressione dell'IRF5 è inducibile dall'attivazione dei TLR nelle cellule immunitarie; considerare il trattamento di linee cellulari (es. THP-1, RAW 264.7) con agonisti dei TLR per potenziare il rilevamento.
• Data la riportata reattività crociata con il topo, questo anticorpo potrebbe essere adatto per modelli murini; tuttavia, validare le prestazioni nel tessuto o tipo cellulare rilevante.
• Per l'immunoprecipitazione (IP), verificare l'efficienza di pull-down dell'anticorpo in sistemi sovraespressi o endogeni, poiché l'IRF5 potrebbe interagire con altre proteine.
• Nell'ELISA, potrebbe essere richiesta una coppia di anticorpi abbinata; considerare l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento mirato a un epitopo non sovrapposto.

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