Anticorpo Policlonale Anti-ITCH per WB, IHC-P, ELISA - Q96J02

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ITCH

• ITCH (ligasi E3 ubiquitina-proteica omologa Itchy, nota anche come AIP4, AIF4, ADMFD, NAPP1) è una ligasi E3 contenente il dominio HECT che accetta ubiquitina dagli enzimi E2 e la trasferisce direttamente alle proteine substrato. Riferimenti correlati: PMID:11046148, PMID:14602072, PMID:15051726
• Catalizza la coniugazione di poliubiquitina legata a Lys-29, Lys-48 e Lys-63, cruciale per il controllo delle vie di segnalazione infiammatoria; come parte di un complesso di editing dell'ubiquitina con TNFAIP3, TAX1BP1 e RNF11, ITCH garantisce un'attivazione transitoria di NF-kappa-B mediando la degradazione di RIPK1. Riferimenti correlati: PMID:17028573, PMID:18718448, PMID:19131965
• ITCH regola l'attività trascrizionale di molteplici fattori (es. JUN, JUNB, NFE2) e molecole della risposta immunitaria (es. MAVS, RIPK2) attraverso l'ubiquitinazione, influenzando la produzione di citochine Th2, lo sviluppo ematopoietico e la segnalazione antivirale. Riferimenti correlati: PMID:16387660, PMID:18718448, PMID:19592251, PMID:19881509
• Localizzata nella membrana cellulare, citoplasma, nucleo e membrane endosomiali, ITCH media l'ordinamento dei recettori (es. CXCR4, FZD4) ubiquitinando i componenti di ESCRT-0 e PI4K2A, collegando l'ubiquitinazione al traffico endocitico. Riferimenti correlati: PMID:14602072, PMID:23146885, PMID:34927784
• ITCH promuove l'apoptosi e l'equilibrio redox mirando a TXNIP per l'ubiquitinazione ramificata insieme a UBR5, e media la segnalazione antiapoptotica di EGF tramite la degradazione di p15 BID. Riferimenti correlati: PMID:20068034, PMID:20392206, PMID:29378950
• Inibisce la replicazione del virus dell'influenza A catalizzando l'ubiquitinazione legata a Lys-48 e la degradazione proteasomiale della proteina virale M1. Riferimenti correlati: PMID:30328013
• ITCH è ampiamente espresso ed è soggetto ad acetilazione, fosforilazione e splicing alternativo, con un peso molecolare di circa 103 kDa.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• Dato che l'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-155) di ITCH umano, questo anticorpo policlonale è probabile che rilevi ITCH a lunghezza intera (~103 kDa) così come potenziali isoforme nei lisati di umano, topo e ratto.
• Per il WB, considerare condizioni riducenti e validare la specificità della banda utilizzando linee cellulari di controllo positivo (es. Jurkat, HeLa) e un controllo negativo (knockdown con siRNA).
• Per IHC-P, ottimizzare i metodi di recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo utilizzando sezioni tissutali note per esprimere ITCH.
• In ELISA, testare formati diretti o di cattura e confermare la reattività con la proteina ITCH ricombinante.
• Includere sempre controlli appropriati adattati al proprio sistema sperimentale.

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