Anticorpo monoclonale di coniglio anti-ITCH (validato KO) per WB, ELISA - Q96J02

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di ITCH

• ITCH (omologo Itchy della ligasi E3 dell'ubiquitina), noto anche come AIP4 e NAPP1, è una ligasi E3 dell'ubiquitina di tipo HECT.
• Agisce come ligasi E3 dell'ubiquitina, accettando l'ubiquitina da un enzima E2 coniugante dell'ubiquitina e trasferendola ai substrati bersaglio. Riferimenti correlati: PMID:11046148, PMID:14602072, PMID:15051726
• Catalizza la coniugazione dell'ubiquitina legata a 'Lys-29', 'Lys-48' e 'Lys-63', consentendo diversi esiti della segnalazione. Riferimenti correlati: PMID:17028573, PMID:18718448, PMID:19131965
• È un componente essenziale di un complesso proteico di editing dell'ubiquitina (complesso A20) che garantisce la natura transitoria della segnalazione infiammatoria promuovendo la degradazione di RIPK1. Riferimenti correlati: PMID:19131965
• Regola negativamente le risposte antivirali dipendenti da MAVS mediante l'ubiquitinazione di MAVS attraverso una coniugazione legata a 'Lys-48', portando alla sua degradazione proteasomica. Riferimenti correlati: PMID:19881509
• Regola lo smistamento endosomiale e la degradazione di recettori quali CXCR4 e FZD4 mediante l'ubiquitinazione dei componenti ESCRT-0 e di PI4K2A. Riferimenti correlati: PMID:14602072, PMID:23146885, PMID:34927784
• Insieme a UBR5, regola l'apoptosi e i livelli di specie reattive dell'ossigeno attraverso l'ubiquitinazione ramificata 'Lys-48'/'Lys-63' e la degradazione proteasomica di TXNIP. Riferimenti correlati: PMID:20068034, PMID:29378950
• Si localizza nella membrana cellulare, nel citoplasma, nel nucleo e nelle membrane endosomiali.
• È ampiamente espresso nei diversi tessuti.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1–100 di ITCH umano, quindi è probabile che l'anticorpo riconosca la regione N-terminale. Confermare la specificità utilizzando lisati cellulari knockout o saggi di competizione con peptide.
• Per il WB, il peso molecolare previsto è di 103 kDa. Ottimizzare la diluizione iniziale utilizzando lisati cellulari pertinenti (ad es. Jurkat, HeLa) di origine umana, murina o di ratto.
• L'anticorpo è indicato come validato KO; si consiglia di utilizzare linee cellulari knockout per ITCH per verificarne la specificità nel proprio sistema sperimentale.
• Per l'ELISA, validare le concentrazioni di rivestimento e le condizioni dell'anticorpo di rilevazione utilizzando la proteina ITCH ricombinante o campioni positivi noti.

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