Anticorpo Policlonale Anti-ITIH3 di Coniglio per WB, ELISA - Q06033

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ITIH3

• ITIH3 (catena pesante H3 dell'inibitore inter-alfa-tripsina) è anche noto come proteina associata all'ialuronano derivata dal siero (SHAP) ed è codificato dal gene ITIH3. Appartiene alla famiglia dell'inibitore inter-alfa-tripsina (ITI).
• ITIH3 può funzionare come trasportatore di ialuronano (HA) nel siero o come proteina legante che collega HA ad altre proteine della matrice, comprese proteine di superficie cellulare, regolando così la localizzazione, la sintesi e la degradazione dell'HA—processi critici per la migrazione cellulare e il rimodellamento tissutale.
• La proteina è secreta e contiene domini della catena pesante che consentono il legame covalente all'ialuronano tramite un legame estere della serina, formando complessi covalenti con HA.
• ITIH3 è classificato come membro della famiglia degli inibitori delle serin proteasi (serpina), sebbene il suo ruolo principale sia nell'organizzazione della matrice extracellulare piuttosto che nell'inibizione delle proteasi; presenta un peptide segnale e multipli siti di glicosilazione.
• Lo splicing alternativo di ITIH3 produce multiple isoforme, che possono avere distribuzione tissutale e proprietà funzionali distinte.
• Le modifiche post-traduzionali chiave includono la glicosilazione N-legata, che influenza la stabilità e la funzione proteica.
• La proteina ha un peso molecolare previsto di ~99.8 kDa, coerente con la banda osservata di ~100 kDa nel western blot; è espressa nel fegato e secreta nel plasma, con ampia distribuzione tissutale grazie al suo ruolo nel metabolismo dell'ialuronano.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 35-180 di ITIH3 umano (NP_002208.3), una regione probabilmente conservata tra le specie, supportando la reattività incrociata riportata con topo e ratto.
• Per il western blot (WB), considerare un range di diluizione iniziale di 1:500–1:2000, sebbene la diluizione ottimale debba essere determinata empiricamente nel sistema di campione target. È attesa una banda vicina a 100 kDa; bande aggiuntive possono riflettere isoforme o complessi.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di rilevamento o di cattura; titolare per stabilire le concentrazioni di lavoro per formati diretti o sandwich.
• Poiché ITIH3 è una proteina secreta, siero, plasma o surnatante di coltura cellulare possono essere tipi di campione adatti. Passaggi di pre-pulizia o arricchimento possono migliorare il rilevamento.
• Convalidare le prestazioni dell'anticorpo nell'applicazione specifica e nella specie di interesse con appropriati controlli positivi e negativi.

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