Anticorpo policlonale coniglio anti-JAK3 per WB, IF/ICC, ELISA - P52333

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di JAK3

• JAK3 (chinasi Janus 3) è una tirosin chinasi proteica non recettoriale codificata dal gene JAK3 nell'uomo. Lo splicing alternativo produce due isoforme: la forma S più lunga e la forma B più corta, che differiscono nella distribuzione tissutale.
• Gioca un ruolo centrale nella trasduzione del segnale delle citochine associandosi ai recettori di tipo I che condividono la catena gamma comune (IL2RG), inclusi i recettori per IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15 e IL-21.
• Al legame del ligando, JAK3 fosforila i residui di tirosina sulla coda citoplasmatica del recettore, creando siti di ancoraggio per i fattori di trascrizione STAT; quindi fosforila gli STAT (es. STAT5A/B), che dimerizzano e si traslocano nel nucleo per regolare l'espressione genica.
• JAK3 è essenziale sia per l'immunità innata che adattativa ed è criticamente coinvolto nello sviluppo delle cellule T e nell'ematopoiesi.
• A livello subcellulare, JAK3 è localizzato nel citoplasma ed è associato al sistema delle membrane intracellulari.
• Espressione tissutale: JAK3 è rilevato nelle cellule NK e nelle linee cellulari simili alle NK, ma non nelle cellule T quiescenti. La forma S predomina nei lignaggi ematopoietici, mentre la forma B si trova sia nelle cellule ematopoietiche che in quelle epiteliali.
• La proteina appartiene alla superfamiglia delle proteine chinasi, alla famiglia delle tirosin proteine chinasi e alla sottofamiglia JAK. Contiene un dominio SH2 e un dominio tirosin chinasi.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione (è una fosfoproteina). Le parole chiave evidenziano anche il suo coinvolgimento in varianti della malattia e nell'immunodeficienza combinata grave (SCID).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 350-530 di JAK3 umano. Per il Western blot, prevedere una banda a circa 125 kDa.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica, considerare protocolli di fissazione e permeabilizzazione adatti per il rilevamento di proteine citoplasmatiche.
• Quando si esegue un ELISA, utilizzare sistemi di blocco e rilevazione appropriati; l'abbinamento con un altro anticorpo JAK3 può essere utile per i saggi a sandwich.
• Essendo un anticorpo policlonale, la variabilità da lotto a lotto può influire sulle prestazioni; si consiglia la validazione nel sistema di campione pertinente.
• Si noti che JAK3 è espresso principalmente nelle cellule immunitarie; i controlli positivi possono includere linee cellulari NK o cellule T attivate.

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