Anticorpo policlonale di coniglio anti-JNK1 per WB, IF, IHC, ELISA - P45983

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della JNK1

• La proteina chinasi 8 attivata da mitogeni (JNK1), codificata dal gene MAPK8, è una chinasi serina/treonina attivata dallo stress che funge da componente chiave della cascata di segnalazione della chinasi N-terminale c-Jun (JNK). È anche nota come SAPK1c e JNK-46.
• Dopo l'attivazione per doppia fosforilazione da parte delle chinasi a monte MAP2K4/MKK4 e MAP2K7/MKK7, la JNK1 transloca nel nucleo e fosforila fattori di trascrizione come c-Jun e ATF2, regolando così l'espressione genica dipendente da AP-1. Riferimenti correlati: PMID:18307971
• La JNK1 promuove l'apoptosi indotta da stress fosforilando proteine chiave tra cui p53 e YAP1, collegando lo stress cellulare alla morte cellulare programmata. Riferimenti correlati: PMID:21364637
• In condizioni di digiuno, la JNK1 fosforila BCL2, causandone il distacco da BECN1 e la successiva attivazione dell'autofagia. Riferimenti correlati: PMID:18570871
• Il gene JNK1 subisce uno splicing alternativo per produrre multiple isoforme (alfa-1, alfa-2, beta-1, beta-2) che mostrano diverse preferenze di legame per i substrati a valle; ad esempio, la beta-1 si lega preferenzialmente a c-Jun, mentre alfa e beta-2 mostrano un legame simile a basso livello sia con c-Jun che con ATF2.
• La JNK1 si localizza prevalentemente nel citoplasma e nel nucleo, ed è stata trovata anche nelle sinapsi delle cellule neuronali, coerentemente con i suoi ruoli nello neurosviluppo e nella funzione sinaptica.
• La JNK1 partecipa a diversi processi fisiologici tra cui la regolazione del ritmo circadiano fosforilando il complesso CLOCK-BMAL1, la differenziazione delle cellule T e la migrazione neuronale. Riferimenti correlati: PMID:22441692

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è stato progettato contro i residui 245–345 all'interno del dominio chinasi della JNK1 umana, una regione altamente conservata tra le specie, che supporta la reattività crociata riportata con topo e ratto. I ricercatori potrebbero considerare di verificare la reattività nel loro specifico modello sperimentale.
• Per il Western blotting, è prevista una banda predominante intorno ai 48 kDa. Includere appropriati controlli positivi e negativi; i lisati cellulari totali da cellule stressate o stimolate (es. HeLa trattate con UV) possono potenziare il segnale a causa della stabilizzazione indotta dall'attivazione.
• Poiché questo anticorpo riconosce la JNK1 totale, il rilevamento della forma attivata (fosforilata) richiede anticorpi separati specifici per la fosforilazione. Si consiglia di eseguire blot paralleli o colorazioni multiplex per distinguere gli stati di attivazione.
• Per le applicazioni ELISA, considerare l'utilizzo dell'anticorpo come reagente di cattura o rilevamento contro la JNK1 ricombinante o lisati cellulari, abbinandolo a un anticorpo non competitivo per i formati a sandwich.

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